| 镰孢菌属实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 |
| |
| 引用本文： | 陈利达,袁军海,李磊,石延霞,柴阿丽,谢学文,李宝聚.镰孢菌属实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J].华北农学报,2019,34(z1). |
| |
| 作者姓名： | 陈利达 袁军海 李磊 石延霞 柴阿丽 谢学文 李宝聚 |
| |
| 作者单位： | 中国农业科学院 蔬菜花卉研究所,北京 100081;河北北方学院,河北 张家口 075061 |
| |
| 基金项目： | 国家重点研发计划;国家重点研发计划;农业部园艺作物遗传改良重点开放实验室 |
| |
| 摘 要： | 为了建立一种快速检测镰孢菌属的方法。根据Fusarium翻译延伸因子(TEF-1α)基因序列,设计并筛选其特异性引物F8-1/F8-2,能从靶标基因组DNA中特异性扩增出大小为187 bp的目的片段,建立Fusarium荧光定量PCR(RT-PCR)检测体系的灵敏度比常规PCR高104倍,且特异性良好。利用该反应体系检测不同湿度环境下病残体和土壤病残体DNA含量的动态变化。结果表明:病残体及土壤病残体DNA初始拷贝数分别为6. 90×10~(11),1. 06×10~(12)拷贝数/g,经过温度27℃、80%湿度下处理30 d病残体DNA含量下降至5. 55×10~8和0拷贝数/g,而在温度27℃、20%湿度下含量分别为8. 04×10~9,1. 30×10~9拷贝数/g。因此,建立的Fusarium实时荧光定量PCR检测体系具有特异性强、灵敏度高的特点,可以快速准确地定量检测病残体DNA的含量,为瓜类根腐病的早期预防和流行监测提供了有效的技术手段。
|
| 关 键 词： | 镰孢菌 实时荧光定量PCR 湿度 病残体 |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
