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猪细小病毒和猪圆环病毒2型二重液相芯片检测方法的建立
引用本文:王晶钰,朱向博,刘业兵,韩雪清,王慧煜,张丽,张磊,张晓杰,唐攀.猪细小病毒和猪圆环病毒2型二重液相芯片检测方法的建立[J].畜牧兽医学报,2012,43(10):1603-1608.
作者姓名:王晶钰  朱向博  刘业兵  韩雪清  王慧煜  张丽  张磊  张晓杰  唐攀
作者单位:1. 西北农林科技大学,杨凌,712100
2. 西北农林科技大学,杨凌712100;中国兽医药品监察所,北京100081
3. 中国兽医药品监察所,北京,100081
4. 中国检验检疫科学研究院 北京100029
基金项目:国家自然科学基金项目(31172341;31172349);十一五国家科技支撑计划项目(2007BAD86B04)
摘    要:作者拟建立检测猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV2)的二重液相芯片(xMAP)检测方法,以满足出入境检疫和临床高通量检测的要求.依据GenBank中PPV结构蛋白VP2基因及PCV2全基因序列,设计PPV和PCV2特异性探针、引物及探针互补序列,将探针与磁性微球偶联,对下游引物和探针互补序列标记生物素,采用不对称性二重PCR扩增靶序列,将PCR产物与偶联好的探针进行杂交,用液相芯片仪进行检测.通过对检测条件优化,建立检测PPV、PCV2两种病毒的二重液相芯片技术,并对临床样本进行检测.建立的PPV和PCV2二重液相芯片检测方法,特异性良好,该方法对PPV和PCV2基因拷贝数检测下限分别为1.53×10 4、2.58×102;对56份临床样品检测表明,该方法与单项PCR检测结果符合率为100%.成功建立了PPV、PCV2二重xMAP检测方法,该检测技术可用于出入境检疫和兽医临床检验.

关 键 词:猪细小病毒  猪圆环病毒2型  二重液相芯片  检测

Establishment of a Diplex xMAP Array for Detection of PPV and PCV2
WANG Jing-yu , ZHU Xiang-bo , LIU Ye-bing , HAN Xue-qing , WANG Hui-yu , ZHANG Li , ZHANG Lei , ZHANG Xiao-jie , TANG Pan.Establishment of a Diplex xMAP Array for Detection of PPV and PCV2[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2012,43(10):1603-1608.
Authors:WANG Jing-yu  ZHU Xiang-bo  LIU Ye-bing  HAN Xue-qing  WANG Hui-yu  ZHANG Li  ZHANG Lei  ZHANG Xiao-jie  TANG Pan
Institution:1(1.Northwest A & F University,Yangling 712100,China;2.China Institute of Veterinary Drug Control,Beijing 100081,China;3.Chinese Academy of Inspection and Quarantine, Beijing 100029,China)
Abstract:
Keywords:
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