金龙胆草SRAP 银染反应体系的建立与优化 |
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引用本文: | 刘姗,高玉莲 孙蓉 唐自钟 高静雷 陈惠.金龙胆草SRAP 银染反应体系的建立与优化[J].广东农业科学,2014,41(1):121-126. |
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作者姓名: | 刘姗 高玉莲 孙蓉 唐自钟 高静雷 陈惠 |
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作者单位: | 1. 四川农业大学生命科学与理学院四川雅安625014
2. 攀枝花学院生物与化学工程学院四川攀枝花617000 |
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基金项目: | 四川省科技创新苗子工程项目(2012ZZ046)攀枝
花学院校级科研项目(2012YB030) |
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摘 要: | 建立适宜金龙胆草DNA 的SRAP-PCR 扩增体系为金龙胆草分子标记打下基础,针对常规银染方法从
是否固定银染液组成银染时间显影液组成等方面优化了金龙胆草SRAP 扩增产物的检测方法同时探索了金龙
胆草SRAP-PCR 反应程序,并对金龙胆草SRAP-PCR 反应体系的各影响因子进行优化结果建立了一个银染步骤
快速高效的银染检查方法筛选的退火温度为51.3,最佳SRAP-PCR 反应体系(15 L) 为院DNA 40 ng,引物浓度
0.7 mol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,Mg2+1.9 mmol/L,Taq 聚合酶0.6 U,10buffer 2 L,双蒸水补足该程序和体系能很好
地满足金龙胆草基因组SRAP 扩增的要求SRAP 标记应用于金龙胆草遗传研究是可行的。
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关 键 词: | 金龙胆草 SRAP PCR 体系优化 |
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