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猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP4细胞核定位研究
引用本文:刘惠莉,方莹.猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白NSP4细胞核定位研究[J].南京农业大学学报,2011,34(4).
作者姓名:刘惠莉  方莹
作者单位:1. 上海市农业科学院畜牧兽医研究所/上海市农业遗传育种重点实验室,上海,201106
2. 美国南达科塔州立大学动物科学系,南达科塔州57007,美国
摘    要:为探讨PRRSV非结构蛋白4(NSP4)功能,体外构建了pEGFP-N1-nsp4真核表达载体,转染Marc-145细胞,利用NSP4-GFP融合蛋白携带的绿色荧光标记,研究NSP4蛋白在Marc-145细胞中的定位,并根据蛋白疏水性设计构建含有nsp4基因N端不同长度的重组pEGFP-N1表达载体,转染细胞以进一步了解NSP4蛋白是否存在核定位信号序列及其在细胞中的分布。试验结果表明:融合蛋白主要位于细胞核,部分在胞浆内。PRRSV NSP4蛋白铰链区(hinge region,HR)145~168氨基酸是决定蛋白核内定位的功能区,该片段缺失影响NSP4蛋白进入细胞核。结论:体外转染细胞内表达的NSP4蛋白主要分布在细胞核内,HR区是其核定位信号,NSP4蛋白通过HR区信号作用主动进入细胞核内。

关 键 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)  非结构蛋白4(NSP4)  核定位  

Nuclear localization of porcine reproductive and respiratory syndrome virus nonstructural protein 4
LIU Hui-li,FANG Ying.Nuclear localization of porcine reproductive and respiratory syndrome virus nonstructural protein 4[J].Journal of Nanjing Agricultural University,2011,34(4).
Authors:LIU Hui-li  FANG Ying
Institution:LIU Hui-li1,FANG Ying2(1.Institute of Animal Sciences and Veterinary Medicine,Shanghai Academy of Agricultural Sciences,Shanghai 201106,China,2.Department of Veterinary and Biomedical Science,South Dakota State University,South Dakota 57007,USA)
Abstract:To demonstrate the function of porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)nonstructural protein 4(NSP4),the recombinant pEGFP-N1-nsp4 was constructed and transfected into Marc-145 cells.The localization of the NSP4 protein fused to an enhanced green fluorescent protein(NSP4-EGFP)was studied in Marc-145 cells using GFP protein as biomarker.Furthermore recombinant plasmids containing partial deleted or truncated portion of the nsp4 gene were designed according to the hydrophobicity of the NSP4 ...
Keywords:porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)  nonstructural protein 4  nuclear localization  
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