| 副猪嗜血杆菌RfaF基因的原核表达及抗原性分析 |
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| 引用本文： | 冯晓辉,余远迪,任玉鹏,岳华,张斌.副猪嗜血杆菌RfaF基因的原核表达及抗原性分析[J].动物医学进展,2013,34(4). |
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| 作者姓名： | 冯晓辉 余远迪 任玉鹏 岳华 张斌 |
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| 作者单位： | 西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都,610041 |
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| 基金项目： | "十二五"国家高技术研究发展(863)计划 |
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| 摘 要： | 副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)RfaF基因编码脂多糖庚糖基转移酶Ⅱ,参与了细菌的黏附入侵和抗血清中补体杀菌作用.为了进一步研究庚糖基转移酶Ⅱ的功能,用原核表达系统表达H.parasuis RfaF基因.用特异性引物扩增H.parasuis SC096株血清4型RfaF基因,得到一条1 053 bp的片段,将其连接到pET-32a(+)载体上,构建重组表达质粒,并将其转化至DH5α感受态细胞中,经酶切、PCR和测序进行鉴定.测序正确后,提取重组质粒,转化至E.coli BL21 (DE3)感受态细胞中,并用IPTG进行诱导.将诱导产物进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果显示,H.parasuis RfaF基因可以在E.coli中表达,重组蛋白分子质量约为55 ku,与预期分子质量大小一致.Western blot分析表明,RfaF蛋白可以与H.parasuis血清4.型阳性高免血清产生特异性结合反应,具有良好的抗原性.本研究结果为深入探讨RafF基因的功能奠定了基础.
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| 关 键 词： | 副猪嗜血杆菌 RfaF基因 原核表达 抗原性 |
Prokaryotic Expression of Haemophilus parasuis RfaF Gene and Antigentic Analysis |
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| FENG Xiao-hui
,
YU Yuan-di
,
REN Yu-peng
,
YUE Hua
,
ZHANG Bing.Prokaryotic Expression of Haemophilus parasuis RfaF Gene and Antigentic Analysis[J].Progress In Veterinary Medicine,2013,34(4). |
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| Authors: | FENG Xiao-hui YU Yuan-di REN Yu-peng YUE Hua ZHANG Bing |
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