| PCV-2 ORF2和PRRSV GP5双基因共表达重组腺病毒的构建及小鼠免疫试验 |
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| 引用本文： | 林初文.PCV-2 ORF2和PRRSV GP5双基因共表达重组腺病毒的构建及小鼠免疫试验[J].动物医学进展,2013,34(4). |
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| 作者姓名： | 林初文 |
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| 作者单位： | 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州,256600 |
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| 摘 要： | 为构建猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP5双基因共表达重组腺病毒,将扩增的ORF2基因和GP5基因通过IRES元件串联,构建重组腺病毒穿梭质粒.然后用Pme Ⅰ酶切穿梭质粒,使其线性化,将线性化质粒转化pAdeasy-1的BJ5183感受态细胞,同源重组后筛选重组腺病毒质粒,经Pac Ⅰ酶切后转染293A细胞进行包装,获得重组腺病毒.PCR鉴定表明重组腺病毒含有ORF2和GP5基因,Western blot检测结果表明ORF2基因和GP5基因在293A细胞内获得表达.重组腺病毒经293A细胞连续传30代,TCID50稳定为10-9.0/mL.初步动物免疫试验结果表明,该重组腺病毒能够刺激机体分别产生PCV-2和PRRSV的特异性抗体免疫应答反应.该重组腺病毒可以作为PCV-2与PRRSV二联基因工程疫苗研究的候选毒株.
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 重组腺病毒 免疫应答 |
Construction of Recombinant Adenovirus Co-expressing PCV-2 ORF2 and PRRSV GP5 Genes and Immunoassay in Mice |
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| LIN Chu-wen.Construction of Recombinant Adenovirus Co-expressing PCV-2 ORF2 and PRRSV GP5 Genes and Immunoassay in Mice[J].Progress In Veterinary Medicine,2013,34(4). |
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| Authors: | LIN Chu-wen |
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