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影响根癌农杆菌介导的高效水稻遗传转化的相关因素分析
引用本文:黄红梅,杨永智,张治国.影响根癌农杆菌介导的高效水稻遗传转化的相关因素分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2004,32(9):4-8.
作者姓名:黄红梅  杨永智  张治国
作者单位:1. 中国农业科学院,生物技术研究所,北京,100081;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100
2. 中国农业科学院,生物技术研究所,北京,100081
3. 西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100
基金项目:国家863计划项目(2001AA225051)
摘    要:以水稻基因组测序品种日本晴(OryzasativaL.ssp.japonica)为材料,对根癌农杆菌介导的水稻转化系统进行了优化。结果表明,水稻种子经质量分数2.5%的次氯酸钠灭菌30min后,愈伤组织诱导率最高;所获得的胚性愈伤组织经过6~7d的继代培养后转化率达到95%;感染液菌浓度OD600值为0.145~0.190时,转化效率高;将抗性愈伤组织进行7d的暗培养可使分化效率提高到85%。应用本转化系统已经获得了大量的转化体,GUS表达率达到30%,并且3个月即可获得转化植株。

关 键 词:根癌农杆菌  水稻  遗传转化
文章编号:1671-9387(2004)09-0004-05
收稿时间:2004/3/22 0:00:00
修稿时间:2004年3月22日

Analysis of factors influencing highly efficient Agrobacterium-mediated rice transformation
HUANG Hong-mei.Analysis of factors influencing highly efficient Agrobacterium-mediated rice transformation[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2004,32(9):4-8.
Authors:HUANG Hong-mei
Institution:HUANG Hong-mei~
Abstract:The rice transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens was optimized by using Oryza sativa L.ssp.japonica cultivars,which is the matrerial of rice genome sequencing.The main results were as following:The frequency of callus induction is the highest when seeds sterilized in 2.5% sodium hypochlorite solution for 30 minutes;The transformation efficiency is the highest when embryogenic calli are subcultured for 6-7 days;the OD_(600)=0.145-0.190 of bacteria concentration is the best for callus transformation;with the 7-day cultivation in dark,the differentiation efficiency of the resistant calli can be improved to 85%.A lot of transformants have been obtained by using the transformation system in three months.GUS gene expression frequency is up to 30%.
Keywords:Agrobacterium tumefaciens  Oryza sativa L    genetic transformation
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