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| H7亚型禽流感病毒HA基因在杆状病毒系统中的表达 | |
| 引用本文： | 郝婧,邓国华,姜永萍,曲站红,王桂芹,郝永清,陈化兰.H7亚型禽流感病毒HA基因在杆状病毒系统中的表达[J].中国预防兽医学报,2007,29(4):268-271. |
| 作者姓名： | 郝婧 邓国华 姜永萍 曲站红 王桂芹 郝永清 陈化兰 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;内蒙古农业大学,动物科学与医学学院,内蒙古,呼和浩特,010018 2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,农业部动物流感重点开放实验室/兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 3. 内蒙古农业大学,动物科学与医学学院,内蒙古,呼和浩特,010018 |
| 摘 要： | 利用PCR反应，以特异性引物扩增禽流感病毒去除信号肽的H7亚型HA密码子优化基因，克隆到杆状病毒转移载体pFastBac-HTB中，转座DH10感受态细胞，通过蓝白斑筛选、PCR鉴定获得阳性克隆，然后提取基因组Bacmid，转染Sf9昆虫细胞，得到含H7亚型流感病毒HA基因的重组杆状病毒opti-H7HA-Bac。重组杆状病毒接种Sf9昆虫细胞，待绝大部分细胞产生细胞病变后收获细胞，细胞裂解产物经血凝试验、SDS-PAGE及Western blot分析证实，密码子优化的H7HA基因在重组杆状病毒opti-H7HA-Bac感染Sf9细胞后获得高效表达，且具有良好的蛋白活性及特异免疫反应原性。 |
| 关 键 词： | 禽流感 H7亚型 HA基因 重组杆状病毒 |
| 文章编号： | 1008-0589（2007）04-0268-04 |
| 收稿时间： | 2006-04-26 |
| 修稿时间： | 2006年4月26日 |
Expression of H7 subtype avian influenza HA protein in baculovirus system |
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| HAO Jing,DENG Guo-hua,JIANG Yong-ping,QU Zhan-hong,WANG Gui-qin,HAO Yong-qing,CHEN Hua-lan.Expression of H7 subtype avian influenza HA protein in baculovirus system[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2007,29(4):268-271. | |
| Authors: | HAO Jing DENG Guo-hua JIANG Yong-ping QU Zhan-hong WANG Gui-qin HAO Yong-qing CHEN Hua-lan |
| Abstract: | The opti-H7HA gene of H7 subtype AIV was PCR amplified from the opti-H7HA-pucl9 plasmid using specific primers. The PCR product was used to construct opti-HTHA-bac recombinant baculovirus using Bac-to-Bac baculovirus expressing system. Expression of opti-HTHA was confirmed by HA test, SDS-PAGE and Western blot. High level of protein expression was detected in SD cells following baculaovirus infection. The recombinant protein possesses an active functionality and strong immunogenicity. |
| Keywords: | avian influenza H7 subtype HA gene recombinant baculovirus |
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