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猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株复合实时荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立
引用本文:赵建军,成丹,李娜,孙元,史子学,涂长春,童光志,仇华吉.猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株复合实时荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立[J].中国兽医科技,2007,37(5):406-412.
作者姓名:赵建军  成丹  李娜  孙元  史子学  涂长春  童光志  仇华吉
作者单位:[1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001 [2]解放军军事医学科学院军事兽医研究所,吉林长春130062 [3]新疆农业大学动物医学院,新疆乌鲁木齐830052
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973)项目(2005CB523202);国家支撑计划项目(2006BAD06A03)
摘    要:根据GenBank中的猪瘟病毒强毒和弱毒株基因组序列设计了1对针对猪瘟病毒的通用引物和2条分别针对猪瘟病毒强毒和猪瘟兔化弱毒疫苗株的特异性TaqMan水解探针,建立了一种能区分猪瘟病毒强毒和兔化弱毒疫苗株的复合实时荧光定量RT—PCR检测方法。结果显示,该方法能将我国大陆流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒株与猪瘟兔化弱毒疫苗株完全区分开来,而不与其他猪源病毒发生非特异反应,分别可检测到初始模板中41.8和81.5个拷贝的病毒RNA,与已建立的复合RT-套式PCR的敏感性相近,两种方法对152份样品检测的符合率达96.9%~100%。通过对8份猪瘟兔化细胞疫苗效价的检测,证实本方法与兔体反应热测定法有一定的相关性,可用于猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗的定量和鉴别检测。

关 键 词:猪瘟病毒  猪瘟兔化弱毒疫苗  复合实时荧光定量RT—PCR  鉴别诊断
文章编号:1673-4696(2007)05-0406-07
收稿时间:2007-02-07
修稿时间:2007-03-06

Development of a multiplex TaqMan real-time RT-PCR for quantitative differentiation of wild-type viruses from C-strain of CSFV
ZHAO Jian-jun ,CHENG Dan ,LI Na ,SUN Yuan ,SHI Zi-xue , TU Chang-chun ,TONG Guang-zhi ,QIU Hua-Ji.Development of a multiplex TaqMan real-time RT-PCR for quantitative differentiation of wild-type viruses from C-strain of CSFV[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2007,37(5):406-412.
Authors:ZHAO Jian-jun  CHENG Dan  LI Na  SUN Yuan  SHI Zi-xue  TU Chang-chun  TONG Guang-zhi  QIU Hua-Ji
Abstract:
Keywords:CSFV  C-strain vaccine  multiplex real-time RT-PCR  differential diagnosis
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