杏高通量荧光SSR检测体系及分子身份证的构建 |
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引用本文: | 赵海娟,章秋平,马小雪,刘宁,张玉萍,张玉君,徐铭,刘家成,刘威生,刘硕.杏高通量荧光SSR检测体系及分子身份证的构建[J].分子植物育种,2023(24):8134-8143. |
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作者姓名: | 赵海娟 章秋平 马小雪 刘宁 张玉萍 张玉君 徐铭 刘家成 刘威生 刘硕 |
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作者单位: | 辽宁省果树科学研究所 |
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摘 要: | 本研究以杏(Prunus armeniaca L.)为试材,根据M13荧光引物和巢式PCR理论,通过调整巢式PCR内两部分循环数、M13荧光引物与正向引物比例和4种荧光(FAM, VIC, NED和PET)产物混合比例3个主要因素,建立了高通量荧光标记SSR检测体系。结果显示,当循环数比设为15∶25、M13荧光引物与正向引物比例为4∶1时,巢式PCR反应体系达到最佳。4种荧光产物按照1μL∶1μL∶1μL∶2μL混合稀释30倍上机检测,所得荧光信号较强、峰高均匀、稳定性好。在建立的体系基础上,筛选了12对多态性良好的李属(Prunus)SSR引物,构建了50份中国杏种质资源的分子身份证。各材料的遗传分子身份证具有唯一性、易读性,可以将种质资源精确的区分开,有利于中国杏种质资源鉴定和保护、品种权益保护和品种创新的激励。
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关 键 词: | 杏 SSR 荧光引物 高通量 分子身份证 |
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