| 棉花GhCOMT3基因的原核表达、纯化及鉴定 |
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| 引用本文： | 李波,倪志勇,范玲.棉花GhCOMT3基因的原核表达、纯化及鉴定[J].华北农学报,2010,25(Z1). |
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| 作者姓名： | 李波 倪志勇 范玲 |
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| 作者单位： | 新疆农业科学院,核技术生物技术研究所,新疆,乌鲁木齐,830091 |
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| 基金项目： | 国家"863"项目，农业部转基因重大专项课题，新疆自治区高技术研究发展计划项目，国家自然科学基金项目 |
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| 摘 要： | 为了深入研究GhCOMT3基因的功能,将GhCOMT3基因构建到原核表达载体pET-28a中,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中。用0.2mmol/L IPTG诱导融合蛋白表达,结果发现,16℃诱导12h、30℃诱导3h和37℃诱导3h后融合蛋白均以包涵体的形式表达;30℃诱导的蛋白表达量最大,之后对包涵体进行变性溶解,进行SDS-PAGE检测,再经过蛋白标记亲和层析柱(His TrapTMHP)纯化得到变性的pET-28a-GhCOMT3融合蛋白,用SDS-PAGE和Western blotting检测纯化效果,鉴定表达产物,目的蛋白相对分子量约为39.119kDa,检测结果与预期一致。结果表明,pET-28a-GhCOMT3蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达产物,为在蛋白水平上研究GhCOMT3基因功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 原核表达 蛋白纯化 |
Prokaryotic Expression,Purification and Identification of Caffeic acid-3-O-methyltransferase Gene from Gossypium hirsuturm L. |
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| LI Bo,NI Zhi-yong,FAN Ling.Prokaryotic Expression,Purification and Identification of Caffeic acid-3-O-methyltransferase Gene from Gossypium hirsuturm L.[J].Acta Agriculturae Boreali-Sinica,2010,25(Z1). |
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| Authors: | LI Bo NI Zhi-yong FAN Ling |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | GhCOMT3 Western blotting |
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