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长白猪IL-2基因克隆及真核表达载体的构建
摘    要:为了对长白猪白细胞介素-2(IL-2)基因的生物学作用进行研究,试验将长白猪外周血淋巴细胞在刀豆素A(ConA)的刺激下培养24 h后,提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增IL-2 cD-NA,克隆到pMD19-T载体并测序。对构建好的T载体双酶切并回收目的片段,将回收片段与pcD-NA3.1(+)载体连接并转化到Top 10中构建真核表达载体。结果表明:克隆的IL-2 cDNA全长为526 bp,ORF全长为465 bp,编码154个氨基酸,与GenBank公布的猪IL-2比对同源性为100%,进而证明成功地克隆了长白猪IL-2 cDNA;并且真核表达载体双酶切及测序表明成功构建了长白猪IL-2真核表达载体。

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