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核桃内果皮4-香豆酸辅酶A连接酶基因克隆及表达分析
引用本文:郭永翠,秦江南,朱玲,张锐.核桃内果皮4-香豆酸辅酶A连接酶基因克隆及表达分析[J].华北农学报,2019,34(2).
作者姓名:郭永翠  秦江南  朱玲  张锐
作者单位:塔里木大学 植物科学学院,新疆 阿拉尔 843300;新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室,新疆 阿拉尔 843300;南疆特色果树高效优质栽培与深加工技术国家地方联合工程实验室,新疆 阿拉尔 843300;新疆伊犁州农业科学研究所,新疆 伊宁,835000
基金项目:国家科技支撑计划;国家自然科学基金;新疆维吾尔自治区研究生科研创新项目
摘    要:为研究新疆核桃露仁机制,以露仁核桃种质温138为研究对象,其突变纸皮核桃为对照,采用RT-PCR技术克隆4CL基因并进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR方法研究核桃硬化过程中4CL基因相对表达量,找到4CL基因在露仁核桃内果皮中硬核发育过程中的表达特性。结果表明,WJ-4CL基因cDNA序列包括552 bp ORF,编码184个氨基酸,分子质量20.10 ku,理论等电点5.83;ZJ-4CL基因包含453 bp ORF,编码151个氨基酸,分子质量16.52 ku,理论等电点9.35;系统进化树表明,温138与纸皮核桃聚为同一支,其亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析表明,露仁核桃4CL基因在花后100 d的相对表达量为花后51 d相对表达量的117倍,硬壳完整核桃4CL基因在花后86 d相对表达量为花后51 d相对表达量的205倍,初步证明4CL基因在硬壳完整和露仁核桃的不同发育时期表达量存在明显差异。表明4CL基因参与核桃内果皮(硬壳)硬化过程且影响内果皮木质素的合成,从而造成核桃内果皮发育不全,出现露仁现象。

关 键 词:核桃  木质素  4-香豆酸辅酶A连接酶  基因克隆  表达分析
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