| 利用CRISPR/Cas9技术编辑Badh2基因改良粳稻香味 |
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| 引用本文： | 孙慧宇,宋佳,王敬国,刘化龙,孙健,莫天宇,徐善斌,郑洪亮,邹德堂.利用CRISPR/Cas9技术编辑Badh2基因改良粳稻香味[J].华北农学报,2019,34(4). |
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| 作者姓名： | 孙慧宇 宋佳 王敬国 刘化龙 孙健 莫天宇 徐善斌 郑洪亮 邹德堂 |
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| 作者单位： | 东北农业大学 农学院,黑龙江 哈尔滨,150030;东北农业大学 农学院,黑龙江 哈尔滨,150030;东北农业大学 农学院,黑龙江 哈尔滨,150030;东北农业大学 农学院,黑龙江 哈尔滨,150030;东北农业大学 农学院,黑龙江 哈尔滨,150030;东北农业大学 农学院,黑龙江 哈尔滨,150030;东北农业大学 农学院,黑龙江 哈尔滨,150030;东北农业大学 农学院,黑龙江 哈尔滨,150030;东北农业大学 农学院,黑龙江 哈尔滨,150030 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划;国家自然科学基金;国家自然科学基金;东农学者计划青年才俊项目 |
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| 摘 要： | CRISPR/Cas9基因编辑技术已经成为水稻育种新型手段,香稻育种一直是水稻育种行业的研究热点,水稻香味主要由8号染色体上的甜菜碱脱氢酶基因Badh2控制。为了改良原有品种的香味性状,促进香稻育种的发展,以非香型粳稻品种东农425为试验材料,构建了2个CRISPR/Cas9敲除载体对Badh2基因进行定点编辑,第1个载体(p YLCRISPR/Cas9-B1-gRNA)的2个靶点分别位于第2和第3外显子上,第2个载体(p YLCRISPR/Cas9-B2-gRNA)的2个靶点均在第2外显子上。采用农杆菌介导法对东农425进行遗传转化,成功获得了T0纯合植株,并对其衍生出的T1植株进行T-DNA元件检测,共获得8个突变类型不同且不含有转基因成分的纯合突变株系。同时采用咀嚼法和氢氧化钾浸泡法对这8个纯合突变株系的水稻籽粒进行香味检测,结果表明,8个Badh2株系均具有不同程度的香味,总体上载体p YLCRISPR/Cas9-B1-gRNA编辑的3个株系的香味更为浓郁。对这8个纯合突变株系的主要农艺性状进行考察,发现突变株系的穗数、穗粒数、结实率及千粒质量与野生型相比均没有明显差异。综上,本研究对东农425的Badh2基因成功地进行了编辑,并获得了香味显著提高且无转基因成分的纯合突变体材料,为加快香型粳稻品种的培育提供了技术支持。
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| 关 键 词： | 粳稻 CRISPR/Cas9 Badh2 香味 |
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