| 水稻膜联蛋白基因OsAnn8干旱和低温条件下表达模式以及CRISPR/Cas9定点编辑 |
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| 引用本文： | 却志群,於紫蕾,沈春修.水稻膜联蛋白基因OsAnn8干旱和低温条件下表达模式以及CRISPR/Cas9定点编辑[J].华北农学报,2019,34(1). |
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| 作者姓名： | 却志群 於紫蕾 沈春修 |
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| 作者单位： | 宜春学院 生命科学与资源环境学院,江西省作物生长发育调控重点实验室,江西 宜春 336000;宜春学院 生命科学与资源环境学院,江西省作物生长发育调控重点实验室,江西 宜春 336000;宜春学院 生命科学与资源环境学院,江西省作物生长发育调控重点实验室,江西 宜春 336000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;江西省自然科学基金;江西省教育厅科学技术研究项目;江西省教育厅科学技术研究项目;实验室开放基金 |
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| 摘 要： | 为了阐明水稻膜联蛋白基因家族成员OsAnn8在干旱和低温胁迫条件下的功能作用机制,通过荧光定量PCR技术对不同干旱和低温处理下的水稻叶片中OsAnn8基因进行转录水平上的定量分析,结果表明,OsAnn8基因在干旱胁迫处理前后表达量呈现出高-低-高的变化趋势,而在冷胁迫处理前后表达量则呈现出低-高-低-低的变化。随后,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对OsAnn8基因进行定点编辑,并借助农杆菌介导将OsAnn8基因靶位点的CRISPR/Cas9基因编辑植物表达载体导入转基因受体品种TP309,经潮霉素筛选后共获得32株转基因阳性植株,靶位点扩增测序峰图分析表明其中的2个单株出现了重叠峰,进一步的T载体克隆分别测序表明,这2个单株为单等位基因敲除,说明本研究已经成功获得了OsAnn8基因靶位点敲除的单等位突变体,不同类型的水稻OsAnn8基因突变体的创建,为水稻膜联蛋白基因家族成员OsAnn8在非生物胁迫条件下的功能研究奠定了材料基础。
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| 关 键 词： | 水稻 膜联蛋白 OsAnn8 荧光定量PCR CRISPR/Cas9 |
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