| 猪链球菌2型c-di-AMP水解蛋白基因gdpP的表达与活性分析 |
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| 引用本文： | 杜斌,孙建和.猪链球菌2型c-di-AMP水解蛋白基因gdpP的表达与活性分析[J].上海交通大学学报(农业科学版),2015(5):34-39. |
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| 作者姓名： | 杜斌 孙建和 |
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| 作者单位： | 上海交通大学 农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海200240,上海交通大学 农业与生物学院,上海市兽医生物技术重点实验室,上海200240 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31172381和31372500)；上海市科技兴农中重点攻关项目(2014-3-1) |
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| 摘 要： | 为研究猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)环二腺苷酸(c-di-AMP)水解蛋白GdpP的生化特性,根据已公布的SS2中国强致病株98HAH33全基因组中的gdpP序列信息设计引物,以SS2强致病株HA9801基因组为模板,通过PCR方法克隆获得了SS2的c-di-AMP水解蛋白基因gdpP完整序列,其阅读框由1 965个核苷酸组成,编码654个氨基酸。应用大肠杆菌重组表达系统,表达、纯化了GdpP,进而分析了其体外生物活性,结果显示纯化的重组蛋白可以在体外水解c-di-AMP形成pApA。其水解酶活性在碱性环境条件下(pH 8.0)相对较强,而在酸性环境下(pH 6.0,6.5)未检测到活性;同时,水解酶活性还依赖于二价金属离子Mg2+、Mn2+以及Co2+的存在,且在Mn2+存在的条件下相对活性最强,而在Ca2+、Fe2+和Cu2+存在的条件下则均未表现出活性。上述结果为进一步深入研究c-di-AMP在猪链球菌2型中发挥的生物学功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 环二腺苷酸 GdpP 水解酶活性 猪链球菌2型 |
| 收稿时间： | 2014/12/21 0:00:00 |
Expression of the c-di-AMP Phosphodiesterase gdpP Gene of Streptococcus suis Serotype 2 and Its Activity Analysis |
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| DU Bin and SUN Jian-he.Expression of the c-di-AMP Phosphodiesterase gdpP Gene of Streptococcus suis Serotype 2 and Its Activity Analysis[J].Journal of Shanghai Jiaotong University (Agricultural Science),2015(5):34-39. |
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| Authors: | DU Bin and SUN Jian-he |
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| Institution: | Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China and Shanghai Key Laboratory of Veterinary Biotechnology,School of Agriculture and Biology,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200240,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | cyclic diadenosine monophosphate GdpP phosphodiesterase activity Streptococcus suis serotype 2 |
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