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牦牛MT-I和MT-Ⅲ基因cDNA3’末端全长的克隆与序列分析
引用本文:刘斌,张利平,吴建平,马彬云,高凤芹,杨联.牦牛MT-I和MT-Ⅲ基因cDNA3’末端全长的克隆与序列分析[J].农业生物技术学报,2008,16(4).
作者姓名:刘斌  张利平  吴建平  马彬云  高凤芹  杨联
作者单位:[1]甘肃农业大学动物科学技术学院,甘肃兰州730070 [2]内蒙古自治区农牧业科学院,内蒙古自治区呼和浩特010031 [3]中国农业科学院草原研究所,呼和浩特010010
摘    要:分别利用基因特异引物YMr-ISP、Ymr-ⅢSP和M13引物M4,通过RT-PCR和3'-RACE方法从牦牛(Bos grunniens)肝脏和大脑组织RNA中分别扩增并克隆出了牦牛Metallothionein-I(MT-I)和Metallothionein-Ⅲ(MT-Ⅲ)cDNA3’末端全长序列(分别为331和378bp,GenBank登录MT-I No.AY758557,MT-Ⅲ No.DQ492300),其中分别包含MT-I,基因编码区全长(183bp)、MT-Ⅲ基因编码区全长(207bp),同时在MT-I和MT-Ⅲ基因cDNA的3’末端具有加尾信号从TAAA和多聚腺苷酸尾巴Poly(A)。分析表明,牦牛MT-I基因编码的MT-I蛋白由61个氨基酸组成,其中20个半胱氨酸(cys)具有保守的三肽结构:C-X-C、C-C-X-C-C、C-X-X-C等,在分子进化上十分保守;MT-Ⅲ编码的蛋白质由68个氨基酸组成,其中19个Cys除了具有与MT-I以上相同的保守短肽结构外,牦牛MT-Ⅲ蛋白质的氨基酸序列还具有T、CPCP、GEGAEA等MT-Ⅲ蛋白质特异的保守短肽结构,在分子进化上亦很保守。这些结构决定了MT-Ⅲ既具有与MT-I相同的重金属解毒等生理功能,又具有区别于MT-I的抑制神经元生长的特异功能。

关 键 词:牦牛  金属硫蛋白  分子克隆  3'-RACE  cDNA
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