| 新城疫病毒Mukteswar株反向遗传平台的建立 |
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| 引用本文： | 魏家阳,李丽,王国康,徐英英,曾哲,罗青平,邵华斌,温国元,商雨,潘兹书.新城疫病毒Mukteswar株反向遗传平台的建立[J].动物医学进展,2023(2):30-35. |
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| 作者姓名： | 魏家阳 李丽 王国康 徐英英 曾哲 罗青平 邵华斌 温国元 商雨 潘兹书 |
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| 作者单位： | 1. 武汉大学生命科学学院;2. 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室畜禽病原微生物学湖北重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31873018)；;国家现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-41-G13)；;湖北省自然科学基金重点类项目(2021CFA019)； |
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| 摘 要： | 为了建立新城疫疫苗株Mukteswar株的反向遗传操作系统，根据Mukteswar株的基因序列设计了9对引物，扩增获得基因组片段，通过Overlap PCR和In-Fusion无缝克隆的技术，将9个片段拼接和插入至pACNR-T7中，获得了Mukteswar株全长cDNA克隆质粒pAC-Mukteswar。将其和3个辅助质粒(pVAX-NP、pVAX-P和pcDNA-L)共转染至预先感染了痘病毒vTF7-3的BHK-21细胞，成功拯救出重组病毒rMukteswar。对rMukteswar的生长曲线、最小致死剂量的平均致死时间(MDT)等生物学特性进行测定，结果显示rMukteswar具有和野生株相似的增殖特性和毒力。成功建立了新城疫疫苗株Mukteswar的反向遗传操作系统，为研发高效率表达外源病原体蛋白的新城疫载体疫苗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 新城疫病毒 Mukteswar株 反向遗传操作系统 |
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