| 鸡MHCⅠ类分子克隆及其二聚体融合基因的构建与表达 |
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| 引用本文： | 戴银,程宝艳,胡晓苗,王骏俊,陈芳芳,余为一.鸡MHCⅠ类分子克隆及其二聚体融合基因的构建与表达[J].中国畜牧兽医,2011,38(3):61-64. |
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| 作者姓名： | 戴银 程宝艳 胡晓苗 王骏俊 陈芳芳 余为一 |
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| 作者单位： | （1.安徽省农业科学院畜牧兽医研究所，安徽合肥 230031； 2.安徽农业大学动物科技学院，安徽合肥 230036） |
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| 摘 要： | 为进一步研究MHCⅠ类分子作用机制，以及为制备MHCⅠ基因工程疫苗奠定基础,克隆鸡MHCⅠ基因，并构建MHCⅠβ2m-α融合基因进行原核表达。运用RT-PCR方法，克隆鸡MHCⅠα和β2m链基因，并通过编码连接肽（Gly4Ser）4的基因序列将两者头尾相连，构建了pET-32a-MHCⅠβ2m-α重组质粒，经PCR扩增、双酶切和测序鉴定后，重组质粒在E.coli BL21细胞进行IPTG诱导表达融合蛋白，采用SDS-PAGE和Western blotting方法分别检测表达产物。结果表明，成功克隆了MHCⅠα和β2m链基因，长度分别为1014和300 bp；构建的融合基因MHCⅠβ2m-α长度为1194 bp，经原核表达，融合蛋白分子质量约为62.0 ku，能与相应的抗体结合，具有一定的免疫学活性。
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| 关 键 词： | 鸡MHCⅠα链 鸡MHCⅠβ2m链 融合蛋白 |
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