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扶桑绵粉蚧钙调蛋白基因的原核表达与表达谱分析
引用本文:罗 梅,宾淑英,林进添.扶桑绵粉蚧钙调蛋白基因的原核表达与表达谱分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2013,41(12):138-142.
作者姓名:罗 梅  宾淑英  林进添
作者单位:仲恺农业工程学院 外来有害生物预警与控制研究所;仲恺农业工程学院 外来有害生物预警与控制研究所;仲恺农业工程学院 外来有害生物预警与控制研究所
基金项目:农业部公益性行业科研专项(201103026);仲恺农业工程学院科研基金项目(G3100004)
摘    要:【目的】探究我国重要入侵生物扶桑绵粉蚧(Phenacoccus solenopsis Tinsley)钙调蛋白基因(PsCam)在各虫态中的表达差异及PsCam蛋白在体外的异源表达,为进一步揭示PsCam的生理功能提供参考。【方法】克隆PsCam基因的ORF,推导其编码的氨基酸序列,采用生物信息学方法,分析扶桑绵粉蚧钙调蛋白的结构。构建PsCam原核表达载体,将其转化到大肠杆菌中进行诱导表达,并对产物进行纯化。采用实时荧光PCR方法,分析该基因在扶桑绵粉蚧各个虫态中的相对表达量。【结果】扶桑绵粉蚧钙调蛋白基因的氨基酸序列分析结果显示,该蛋白没有信号肽,具有2个EF-hand钙结合结构域,有13个Ca2+结合位点。成功构建了原核表达载体pET28a-PsCam,经诱导表达后获得了重组的Cam蛋白,目的蛋白的分子质量约为17ku。PsCam mRNA在不同虫态的扶桑绵粉蚧中都有表达,在成熟雌虫中的表达量最低,在1龄幼虫中的表达量最高,是成熟雌虫的7.1倍。【结论】在原核表达系统中诱导表达了重组PsCam蛋白;PsCam基因在扶桑绵粉蚧不同虫态中差异表达。

关 键 词:扶桑绵粉蚧  钙调蛋白  基因表达谱  原核表达
收稿时间:2013/1/13 0:00:00

Prokaryotic expression and expression profiling of calmodulin genes in mealybug Phenacoccus solenopsis Tinsley (Hemiptera:Pseudococcidae)
LUO Mei;BIN Shu-ying;LIN Jin-tian.Prokaryotic expression and expression profiling of calmodulin genes in mealybug Phenacoccus solenopsis Tinsley (Hemiptera:Pseudococcidae)[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2013,41(12):138-142.
Authors:LUO Mei;BIN Shu-ying;LIN Jin-tian
Institution:LUO Mei;BIN Shu-ying;LIN Jin-tian;Institute for Management of Invasive Alien Species,Zhongkai University of Agriculture and Engineering;
Abstract:
Keywords:Phenacoccus solenopsis  calmodulin  gene expression profile  prokaryotic expression
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