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斑点叉尾鮰病毒“自杀性”DNA疫苗的构建及其体外表达检测
引用本文:熊海林,尹殿卯,王卫民,王 敏,李莉娟,刘玉林,刘学芹,吴 兵,黄锋涛.斑点叉尾鮰病毒“自杀性”DNA疫苗的构建及其体外表达检测[J].水生态学杂志,2011,32(1):84-88.
作者姓名:熊海林  尹殿卯  王卫民  王 敏  李莉娟  刘玉林  刘学芹  吴 兵  黄锋涛
作者单位:华中农业大学水产学院,农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,湖北,武汉430070
基金项目:国家自然科学基金项目(面上项目,重点项目,重大项目)
摘    要:根据CCVORF6基因序列,设计合适的引物,扩增ORF6基因,分别将其克隆到"自杀性"DNA疫苗载体pS-FV与常规DNA疫苗载体pcDNA3.1(+)中,转化感受态细胞DH5α后提取质粒,构建斑点叉尾鮰(Ictalurus punc-tatus)"自杀性"DNA疫苗ps-ORF6与常规DNA疫苗pcd-ORF6,利用转化后的大肠杆菌菌液为模板进行PCR扩增、提取质粒酶切鉴定以及序列测定等方法证实重组质粒构建正确。将重组质粒转染人胚肾细胞(293T),间接免疫荧光试验表明ORF6均获得表达,但"自杀性"DNA疫苗的表达效果不如常规DNA疫苗,该研究为这2种疫苗进一步的鱼体试验奠定了基础。

关 键 词:斑点叉尾鮰病毒  “自杀性”DNA疫苗  构建  表达
收稿时间:2010/7/12 0:00:00
修稿时间:8/23/2010 8:58:20 PM

Construction and Expression Characteristic in vitro of Channel Catfish Virus Suicide DNA Vaccine
xiong hai ling,yin dian mao,wang wei min,wang min,li li juan,liu yu ling,liu xue qin,wu bing and huang feng tao.Construction and Expression Characteristic in vitro of Channel Catfish Virus Suicide DNA Vaccine[J].Journal of Hydroecology,2011,32(1):84-88.
Authors:xiong hai ling  yin dian mao  wang wei min  wang min  li li juan  liu yu ling  liu xue qin  wu bing and huang feng tao
Institution:Huazhong Agricultural University
Abstract:
Keywords:CCV  suicide DNA vaccine  construction  expression
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