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| 抗CPV-2a单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 王净,李刚,王鹏,曾妮,穆秀明,高志花,王慧文,史利军.抗CPV-2a单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立[J].广西农业生物科学,2011,30(3):357-363. |
| 作者姓名： | 王净 李刚 王鹏 曾妮 穆秀明 高志花 王慧文 史利军 |
| 作者单位： | 1. 河北北方学院动物科技学院,张家口,075131 2. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193 3. 河北北方学院农林科技学院,张家口,075131 |
| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金 |
| 摘 要： | 犬细小病毒病是危害养犬业的重要传染病之一,患病犬难以治愈。单克隆抗体治疗此病效果明显,本文介绍了制备抗CPV-2a单克隆抗体的方法。用纯化的犬细小病毒（canine parvovirus,CPV）2a型分离株免疫新西兰大白兔和Balb/c小鼠制备抗CPV-2a多克隆抗体及单克隆抗体。经亚克隆得到1H9、2B5、2B7和2C7共4株单抗,Western blotting鉴定单抗的免疫反应性;间接ELISA方法检测单抗的特异性。为了快速对犬细小病毒病作出诊断,建立了CPV-2a双抗夹心ELISA方法。兔多抗作为捕获抗体,鼠单抗作为示踪抗体,辣根过氧化物酶标记羊抗鼠IgG作为检测系统;捕获抗体和示踪抗体最佳稀释度分别为1：800和1：2000;检测系统最佳稀释度为1：4000。结果表明：所得4株单抗与pET-32a-VP2蛋白发生特异性反应,且与狂犬病毒（RV）、犬温热病毒（CDV）不交叉反应;建立的双抗夹心ELISA方法对病毒的最低检出量为4.375μg/mL,与美国RB试剂盒相比,符合率为95%。单抗制备为犬细小病毒病的治疗奠定了基础;双抗夹心ELISA方法的建立为疑似粪便样本提供了简单、快速和可靠的检测手段。 |
| 关 键 词： | 犬细小病毒 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA |
Preparation of Monoclonal Antibody Against CPV-2a and Establishment of Double Antibody Sandwich ELISA Detection Method t |
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| Wang Jing,Li Gang,Wang Peng,Zeng Ni,Mu Xiuming,Gao Zhihua,Wang Huiwen,Shi Lijun.Preparation of Monoclonal Antibody Against CPV-2a and Establishment of Double Antibody Sandwich ELISA Detection Method t[J].Journal of Guangxi Agricultural and Biological Science,2011,30(3):357-363. | |
| Authors: | Wang Jing Li Gang Wang Peng Zeng Ni Mu Xiuming Gao Zhihua Wang Huiwen Shi Lijun |
| Institution: | 1 College of Animal Science and Technology,Hebei North University,Zhangjiakou,075131;2 Beijing Institute of Animal Science and Veterinary Medicine,Chinese Academy of Agricultural Science,Beijing,100193;3 College of Farming and Forestry Technology,Hebei North University,Zhangjiakou,075131 |
| Abstract: | The canine parvovirus（CPV）,which is hard to get cured,is one of the most severe diseases in dogs.However,an effective therapeutic method for the CPV is the monoclonal antibody.This article described the approach to the preparation of anti-CPV-2a monoclona |
| Keywords: | Canine parvovirus Monoclonal antibody Double antibody sandwich ELISA |
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