| 根癌农杆菌介导转褪黑素基因草莓的获得 |
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| 引用本文： | 王玉华,韩晓玲,郝建国,贾敬芬.根癌农杆菌介导转褪黑素基因草莓的获得[J].核农学报,2009,23(5):766-772. |
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| 作者姓名： | 王玉华 韩晓玲 郝建国 贾敬芬 |
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| 作者单位： | 1. 陕西省生物技术重点实验室/西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室/西北大学生命科学学院,陕西,西安,710069
2. 西安力邦制药有限公司医药科学研究所,陕西,西安,710075 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30671082);;陕西省自然科学基金(2006C102);;西北大学西部资源生物与现代生物技术重点实验室开放基金 |
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| 摘 要： | 为建立根癌农杆菌介导的草莓褪黑素基因高效遗传转化体系，以草莓品种“早红”叶片和叶柄为外植体，优化了影响根癌农杆菌遗传转化的因素，包括农杆菌菌液浓度、侵染时间、共培养时间和预培养时间等，建立了适宜草莓“早红”的农杆菌遗传转化体系。结果表明，“早红”草莓适宜的转化条件是：外植体的最适预培养时间为2～3 d，农杆菌侵染的最佳菌液浓度为OD600 0.3～0.5，最适侵染时间为15 min，最适共培养时间为3 d。在此基础上，通过根癌农杆菌介导法将褪黑素合成关键酶N -乙酰转移酶（AANAT）和羟吲哚-氧甲基转移酶（HIOMT）基因AANAT和HIOMT转入草莓基因组，并对获得的抗性植株进行PCR和PCR-Southern blot检测分析，结果表明外源基因已经整合进草莓基因组中。RT-PCR分析证明外源基因已经在转录水平表达。
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| 关 键 词： | 农杆菌 褪黑素 草莓 遗传转化 |
| 收稿时间： | 2009-12-31 |
| 修稿时间： | 2009-12-31 |
Obtaining of Transgenic Plants of Strawberry by Agrobacterium Tumefaciens Harboring Melatonin Synthetase Genes |
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| WANG Yu-hua,HAN Xiao-ling,HAO Jian-guo,JIA Jing-fen.Obtaining of Transgenic Plants of Strawberry by Agrobacterium Tumefaciens Harboring Melatonin Synthetase Genes[J].Acta Agriculturae Nucleatae Sinica,2009,23(5):766-772. |
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| Authors: | WANG Yu-hua HAN Xiao-ling HAO Jian-guo JIA Jing-fen |
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| Institution: | Shaanxi Provincial Key Laboratory of Biotechnology / Key Laboratory of Resource Biology and Biotechnology in Western China / College of Life Sciences, Northwest University, Xi’an, Shaanxi 710069 |
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| Abstract: | In order to establish Agrobacterium tumefaciens-mediated melatonin synthetase genes transformation system for strawberry, leaves or petioles were used as explants, and some factors influencing the transformation efficiency, such as the concentration and infection duration of Agrobacterium, the time of both co-culture and pre-culture, were optimized to establish a stable Agrobacterium mediated gene transfomation protocol of strawberry. The results indicated that the optimal pre-culture time of explants was 2... |
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| Keywords: | Agrobacterium tumefaciens melatonin strawberry genetic transformation |
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