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番茄斑萎病毒4种检测方法比较
引用本文:赵巍巍,杨家强,周小毛,吴青君.番茄斑萎病毒4种检测方法比较[J].植物保护,2015,41(2):108-113.
作者姓名:赵巍巍  杨家强  周小毛  吴青君
作者单位:1.湖南农业大学农药研究所, 长沙410128; 2.中国农业科学院蔬菜花卉研究所, 北京100081
基金项目:国家科技支撑计划(2012BAD19B06); 北京市自然科学基金(6122028); 现代农业产业技术体系北京市叶类蔬菜创新团队建设专项资金(blvt-15); 北京市科委课题(Z121100001212006); 蔬菜有害生物控制与优质栽培北京市重点实验室
摘    要:本研究根据番茄斑萎病毒(TSWV)S RNA上的核衣壳蛋白(N)基因保守序列设计特异性引物,比较了4种检测方法的灵敏度。结果表明,特异性引物可扩增出397bp的片段,序列和已发表的TSWV核苷酸序列同源性高达99%,可用于常规PCR和荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测。qRT-PCR的灵敏度比快速检测试纸条、双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA)和常规PCR分别高出15 625倍、3 125倍和125倍,且能够准确定量;常规PCR灵敏度较高,但不能准确定量;DAS-ELISA方法适用于批量定性测定,但检测时间较长;试纸条法检测速度最快,但灵敏度最低,使用时可根据症状程度和试验条件选择适宜的检测方法。

关 键 词:番茄斑萎病毒  DAS-ELISA  常规PCR  快速检测试纸条  qRT-PCR  灵敏度
收稿时间:7/4/2014 12:00:00 AM
修稿时间:2014/10/9 0:00:00

Comparison of four methods for detecting Tomato spotted wilt virus
Zhao Weiwei,Yang Jiaqiang,Zhou Xiaomao,Wu Qingjun.Comparison of four methods for detecting Tomato spotted wilt virus[J].Plant Protection,2015,41(2):108-113.
Authors:Zhao Weiwei  Yang Jiaqiang  Zhou Xiaomao  Wu Qingjun
Institution:1. Institute of Pesticide Science, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China; 2. Institute of Vegetables and Flowers, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China
Abstract:
Keywords:Tomato spotted wilt virus  DAS-ELISA  conventional PCR  rapid detection test strip  qRT-PCR  sensitivity
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