太子参BBWV2和TuMV的巢式RT-PCR检测 |
| |
引用本文: | 匡云波,侯令,方晓勤,王佳璐,杨燕君,叶祖云.太子参BBWV2和TuMV的巢式RT-PCR检测[J].福建农业学报,2018(3). |
| |
作者姓名: | 匡云波 侯令 方晓勤 王佳璐 杨燕君 叶祖云 |
| |
作者单位: | 宁德师范学院生命科学学院;福建省特色药用植物工程技术研究中心 |
| |
摘 要: | 为探求快速、灵敏的太子参脱毒检测技术,建立太子参蚕豆萎蔫病毒2(Broad bean wilt virus 2,BBWV2)和芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)的巢式RT-PCR快速检测方法,根据GenBank数据库中这2种病毒外壳蛋白(coat protein,cp)基因核苷酸序列的保守区域分别设计2对简并引物,建立和优化巢式RT-PCR扩增体系,继而进行常规RT-PCR和巢式RT-PCR灵敏度的比较,并应用巢式RT-PCR对7份田间栽培太子参病样和4份脱毒苗样品进行检测。结果显示:BBWV2、TuMV的巢式引物最佳退火温度分别为60、62℃;采用巢式RT-PCR,这两种病毒样品cDNA原液在稀释10~5倍后仍能扩增出特异性条带,比常规RT-PCR的灵敏度至少高10倍。本研究建立的巢式RT-PCR检测方法可快速、稳定、准确地检测BBWV2和TuMV,且具有更高的灵敏度,更能满足太子参脱毒检测的需要。
|
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|