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视黄酸信号通路在青鳉精原干细胞体外增殖与分化中的作用
引用本文:王园,李名友,白孝明,屈锡梅,罗玉冰,王德寿,魏静.视黄酸信号通路在青鳉精原干细胞体外增殖与分化中的作用[J].水产学报,2023,47(7):079104-1-079104-10.
作者姓名:王园  李名友  白孝明  屈锡梅  罗玉冰  王德寿  魏静
作者单位:西南大学生命科学学院淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室,上海海洋大学水产与生命学院,西南大学生命科学学院淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室,西南大学生命科学学院淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室,西南大学生命科学学院淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室,西南大学生命科学学院淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室,西南大学生命科学学院淡水鱼类资源与生殖发育教育部重点实验室
基金项目:国家自然科学基金(31972776); 重庆市自然科学(cstc2020jcyj-msxmX1045)
摘    要:为探究视黄酸(Retinoic acid, RA)在鱼类精原干细胞(Spermatogonial stem cells, SSC)增殖与分化中的作用,本研究首先以三荧光报告载体pGRY(延伸因子1α启动子驱动组蛋白H2B-绿色荧光融合蛋白、减数分裂联会复合体蛋白3(Scp3)启动子驱动嘌呤霉素红色荧光融合蛋白、精蛋白启动子驱动黄色荧光蛋白)转染青鳉精原干细胞系SG3,获得稳转细胞SG3-pGRY,然后分别在2D与3D培养条件下检测RA信号对其增殖与分化的影响。结果显示,稳转细胞SG3-pGRY的红色荧光可监测细胞内源性Scp3的表达,且细胞仍保持干性及分化潜能,表明其可用于监测细胞分化状态。在2D培养条件下,即在细胞培养板中待细胞生长密度约90%就进行传代培养,RA可显著抑制细胞增殖,其受体α、β、γ泛抑制剂BMS493可促进细胞增殖;第48 h,RA处理可下调细胞多能性相关基因pou5f3、klf4表达,上调减数分裂相关基因dazl表达,但对其他减数分裂相关基因如scp3表达无明显影响;第8 d,处理组及对照组均未能观察到红色荧光,这与已有报道RA处理体外培养小鼠SSC可显著促进Scp3表达,并进入减数分裂I期偶线期的研究结果明显不同。在3D培养条件下,即用96孔球形低吸附微量培养板进行培养,48 h后细胞成球状体聚集生长,RA、 BMS493处理组、对照组在48 h后均观察到明显红色荧光,减数分裂相关基因表达与2D相比显著上调;第8 d与34 d,RA处理组减数分裂相关基因表达均显著高于对照组,而BMS493处理组低于对照组。综上,RA信号可抑制SG3增殖,促进其分化,但不是诱导细胞发生减数分裂的关键分子。本研究不仅为鱼类SSC分化相关研究提供了良好研究模型,而且促进了我们对于RA信号在鱼类SSC增殖与分化中作用的深入认识。

关 键 词:视黄酸  青鱂  精原干细胞  增殖  分化  减数分裂
收稿时间:2021/8/13 0:00:00
修稿时间:2021/9/14 0:00:00

Role of retinoic acid signaling in the proliferation and differentiation of medaka (Oryzias latipes) spermatogonial stem cells in vitro
Yuan WANG,Mingyou LI,Xiaoming BAI,Ximei QU,Yubing LUO,Deshou WANG,Jing WEI.Role of retinoic acid signaling in the proliferation and differentiation of medaka (Oryzias latipes) spermatogonial stem cells in vitro[J].Journal of Fisheries of China,2023,47(7):079104-1-079104-10.
Authors:Yuan WANG  Mingyou LI  Xiaoming BAI  Ximei QU  Yubing LUO  Deshou WANG  Jing WEI
Institution:Key Laboratory of Freshwater Fish Reproduction and Development,Ministry of Education,Laboratory of Aquatic Science of Chongqing,School of Life Sciences,Southwest University, Chongqing,China,Key Laboratory of Genetic Resources for Freshwater Aquaculture and Fisheries,Ministry of Agriculture,College of Fisheries and Life Science,ShanghaiOcean University,Shanghai,Key Laboratory of Freshwater Fish Reproduction and Development,Ministry of Education,Laboratory of Aquatic Science of Chongqing,School of Life Sciences,Southwest University, Chongqing,China,Key Laboratory of Freshwater Fish Reproduction and Development,Ministry of Education,Laboratory of Aquatic Science of Chongqing,School of Life Sciences,Southwest University, Chongqing,China,Key Laboratory of Freshwater Fish Reproduction and Development,Ministry of Education,Laboratory of Aquatic Science of Chongqing,School of Life Sciences,Southwest University, Chongqing,China,Key Laboratory of Freshwater Fish Reproduction and Development,Ministry of Education,Laboratory of Aquatic Science of Chongqing,School of Life Sciences,Southwest University, Chongqing,China,Key Laboratory of Freshwater Fish Reproduction and Development,Ministry of Education,Laboratory of Aquatic Science of Chongqing,School of Life Sciences,Southwest University, Chongqing,China
Abstract:
Keywords:Retinoic acid  Oryzias latipes  Spermatogonial stem cell  proliferation  differentiation  meiosis
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