斑马鱼chac1基因的表达特征及其在髓系造血中的功能研究 |
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引用本文: | 陈紫涵,周静,王德成,晏博.斑马鱼chac1基因的表达特征及其在髓系造血中的功能研究[J].淡水渔业,2023(6):3-12. |
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作者姓名: | 陈紫涵 周静 王德成 晏博 |
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作者单位: | 1. 三峡大学肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室,三峡大学感染与炎症损伤研究所,三峡大学基础医学院;2. 上海市(复旦附属)公共卫生临床中心结核病研究中心 |
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基金项目: | 上海市“科技创新行动计划”医学创新研究领域项目(22Y11920500); |
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摘 要: | 为探索chac1基因(ChaC glutathione specific gamma-glutamylcyclotransferase 1)在早期胚胎发育中的功能,本研究以斑马鱼(Danio rerio)为研究对象首先分析了斑马鱼Chac1蛋白的序列特征并用qRT-PCR检测了chac1在斑马鱼胚胎不同发育阶段和成鱼不同组织中的表达模式,通过CRISPR/Cas9基因编辑技术在chac1基因的三个外显子上设计了3条sgRNA并通过测序及qRT-PCR检测其敲除效率。苏丹黑染色3 dpf(days post fertilization)野生型和chac1突变型斑马鱼幼鱼的中性粒细胞数量;qRT-PCR检测突变斑马鱼髓系造血相关因子。结果显示:chac1是母源基因,在受精后0~3 hpf(hours post fertilization)时其表达量较高,之后随着母本基因的影响逐渐变小,chac1的mRNA表达量下降;在斑马鱼成鱼中,其在肌肉、卵巢、脑中高表达;此外,突变型斑马鱼较野生型斑马鱼相比,其苏丹黑染色阳性信号更多;chac1突变后髓系造血转录调控因子pu.1的mRNA水平上调。综上...
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关 键 词: | chac1 斑马鱼(Danio rerio) 髓系造血 中性粒细胞 表达 |
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