| 鳗鲡圆环病毒SYBR Green Ⅰ qPCR检测方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 林而舒.鳗鲡圆环病毒SYBR Green Ⅰ qPCR检测方法的建立与应用[J].淡水渔业,2023(3):54-61. |
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| 作者姓名： | 林而舒 |
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| 作者单位： | 福建省淡水水产研究所 |
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| 摘 要： | 为建立鳗鲡圆环病毒(Eel circovirus,EeCV)的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法，根据EeCV复制相关蛋白(replication-associated protein, RAP)基因的保守序列设计特异性引物，并评价其灵敏性、特异性、重复性和应用效果。qPCR的阈值循环数(Cycle threshold value,Ct值)与标准品的拷贝数线性关系良好，且线性范围广(1.0×108～102拷贝数/μL);可特异性检测EeCV,而对鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus)、猪圆环病毒(Porcine circovirus)、鸭圆环病毒(Duck circovirus)无扩增；重复性强，组内和组间变异系数均小于3%;灵敏性高于普通PCR法10倍。且qPCR检测后发现，在感染EeCV的鳗鲡体内重要器官均可检测到EeCV,其中鳃的病毒量显著高于其他组织；对保存的44份疑似鳗鲡病毒性感染病料进行检测，阳性检出率为98%,而普通PCR法的阳性检出率为73%。
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| 关 键 词： | 鳗鲡圆环病毒(Eel circovirus) 荧光定量PCR SYBR GreenⅠ 检测方法 |
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