| 新城疫病毒F48E9株V基因的表达及其抗血清的制备 |
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| 引用本文： | 韩放,闫丽辉,曹殿军,刘培欣,李景鹏.新城疫病毒F48E9株V基因的表达及其抗血清的制备[J].中国兽医科技,2006,36(5):357-361. |
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| 作者姓名： | 韩放 闫丽辉 曹殿军 刘培欣 李景鹏 |
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| 作者单位： | [1]中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江哈尔滨150001 [2]东北农业大学,黑龙江哈尔滨150030 |
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| 摘 要： | 采用PCR方法从鸡源新城疫病毒（NDV）强毒F48E9株P基因重组质粒中扩增出了V基因全长cDNA，并引进相应的突变位点，将其克隆到pMD18-T载体，然后亚克隆到原核表达载体pET-30c上，重组质粒经酶切、PCR鉴定及测序，筛选出阳性重组质粒，并命名为pET-30c-V。将pET-30c-V转化大肠埃希氏菌BL21（DE3），用1mmol／LIPTG 37℃过夜诱导表达，SDS-PAGE及Western-blotting分析结果表明，所表达的NDVV重组蛋白主要以包涵体形式存在，分子质量约28ku，与理论值大小相符。将包涵体用8mol／L脲变性，经Ni-NTA柱纯化，透析复性，得到纯化的V蛋白。用复性后的V蛋白免疫21日龄SPF鸡（300μg／只），成功制备了抗鸡NDVV蛋白的抗血清。
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| 关 键 词： | 新城疫病毒 V基因 原核表达 |
| 文章编号： | 1673-4696（2006）05-0357-05 |
| 收稿时间： | 2006-01-13 |
Expression of V gene the preparation of Newcastle disease of specific antiserum virus F48E9 strain and against V protein |
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| HAN Fang, YAN Li-hui, CAO Dian-jun , LIU Pei-xin ,LI Jing-peng.Expression of V gene the preparation of Newcastle disease of specific antiserum virus F48E9 strain and against V protein[J].Chinese Journal of Veterinary Science and Technology,2006,36(5):357-361. |
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| Authors: | HAN Fang YAN Li-hui CAO Dian-jun LIU Pei-xin LI Jing-peng |
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| Keywords: | Newcastle disease virus V gene prokaryotic expression |
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