| 棉花液泡膜H~+-ATPase A亚基的克隆及表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 刘娜,倪志勇,朱燕飞,陈全家,曲延英.棉花液泡膜H~+-ATPase A亚基的克隆及表达载体的构建[J].分子植物育种,2015(3):541-546. |
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| 作者姓名： | 刘娜 倪志勇 朱燕飞 陈全家 曲延英 |
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| 作者单位： | 新疆农业大学农学院新疆农业大学农业生物技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家863项目(2012AA101108);转基因生物新品种培育项目(2013ZX005004-009);新疆维吾尔自治区自然科学基金项目(2014211A025);作物遗传育种重点学科资助项目;新疆农业大学草业科学国家级重点学科共同资助 |
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| 摘 要： | 液泡膜H+-ATPase在植物应对非生物胁迫中起着十分重要的作用,对其关键亚基基因的克隆及分析,有助于阐释V-ATPase在逆境下的调节及响应机制。本研究利用RT-PCR技术从棉花中克隆了一个液泡膜H+-ATPase亚基A基因,命名为Gh VHA-A。该基因ORF为1 872 bp,编码623个氨基酸,预测的蛋白质理论分子量为68.41 k D,等电点为5.17。通过氨基酸序列比对和系统进化树分析发现,Gh VHA-A与可可V-ATPase A亚基的同源性最高,达到97.9%,在进化上亲缘关系较近;且在编码蛋白的氨基酸序列上有两个与ATP或GTP的磷酸基团相互作用的保守结构域"GAFGCGKT"和"PSVNWLISYS",说明A亚基是相对保守的。本研究构建了植物表达载体p CAMBIA 1304-VHA-A,并转入到根癌农杆菌(GV3101)中,为后续研究棉花V-ATPase A亚基基因在干旱胁迫应答中的功能奠定试验基础。
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| 关 键 词： | 棉花 V-ATPase 克隆 植物表达载体 |
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