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越橘离体茎尖包埋玻璃化超低温保存
引用本文:毛宇金,李娴,张志东,苏原慧,梁杉,孙海悦,李亚东.越橘离体茎尖包埋玻璃化超低温保存[J].吉林农业大学学报,2023(2):155-162.
作者姓名:毛宇金  李娴  张志东  苏原慧  梁杉  孙海悦  李亚东
作者单位:吉林农业大学园艺学院,吉林省小浆果遗传育种与创新利用工程中心
基金项目:吉林省科技发展计划项目(20170414023GH,20180201076NY);
摘    要:为越橘种质资源保存提供新途径,试验研究了越橘组培苗茎尖包埋玻璃化法超低温保存方法。结果显示适宜的条件包括:剥取顶芽茎尖(长1.0~1.5 mm),在(25±2)℃黑暗条件下预培养1 d;使用移液枪吸取茎尖与藻酸盐溶液,滴入氯化钙溶液中形成包埋球(直径4 mm);包埋球在加载液中加载1.5 h(室温);包埋球转入PVS2溶液处理4 h(0℃);将装有包埋球的冷冻管投入液氮保存1 h;取出液氮中的冷冻管迅速转入37℃水浴锅中解冻1~2 min,在室温下取出包埋球,在卸载液中卸载20 min;卸载的茎尖在再生培养基上(25±2)℃黑暗培养5 d;之后在正常光照条件下培养30 d。所测试的8个越橘基因型平均再生率为57.9%,最高再生率为78.5%,最低为41.7%。

关 键 词:越橘  超低温保存  小滴玻璃化  组培苗茎尖
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