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荔枝蒂蛀虫卵5个化学感受蛋白的基因克隆及除虫脲对其表达的影响
引用本文:姚琼,全林发,聂晶,徐淑,李文景,董易之,陈炳旭.荔枝蒂蛀虫卵5个化学感受蛋白的基因克隆及除虫脲对其表达的影响[J].华南农业大学学报,2021,42(5):60-68.
作者姓名:姚琼  全林发  聂晶  徐淑  李文景  董易之  陈炳旭
作者单位:广东省农业科学院 植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室,广东 广州 510640
基金项目:国家自然科学基金(31801800);广东省自然科学基金(2020A151501960);广东省农业科学院科技创新战略专项(R2019PY-QY001);国家现代农业(荔枝龙眼)产业技术体系建设专项 (CARS-32-12)
摘    要:目的 获得荔枝蒂蛀虫Conopomorpha sinensis 5个化学感受蛋白(Chemosensory proteins,CSPs)基因CsinCSPs的全长序列,并解析除虫脲对其表达的影响。方法 提取荔枝蒂蛀虫卵总RNA,利用转录组测序结果和cDNA末端快速扩增技术(Rapid amplification of cDNA ends,RACE)获得5个CsinCSPs基因的全长序列;对序列进行生物信息学分析,用Phyre2在线软件进行同源建模,用AutoDock软件对蛋白与农药分子进行分子对接预测;用荧光定量PCR方法分析在除虫脲处理荔枝蒂蛀虫卵后这5个基因的表达情况。结果 从荔枝蒂蛀虫卵中克隆了5个CsinCSPs基因的全长序列,序列分析结果表明,这5个基因的编码蛋白具有昆虫化学结合蛋白的典型特征,其保守半胱氨酸位点排布模式均为C1-X6-C2-X18-C3-X2-C4,并分为了包含5个α-螺旋和6个α-螺旋的2个类群。软件模板分析表明,5个CsinCSPs蛋白的三维结构均由α-螺旋、β-折叠和卷曲环组成,且与甘蓝夜蛾Mamestra brassicae CSP2的三维结构相似度最高。分子对接数据表明,5个CsinCSPs与2个菊酯类药剂分子结合亲和力最强,与除虫脲的结合力最弱。亚致死剂量除虫脲处理荔枝蒂蛀虫卵后,CsinCSP3和CsinCSP5分别在处理后6、24 h表达上调超过40余倍,48 h则表达下降。结论 化学感受蛋白CsinCSPs可能参与农药胁迫下荔枝蒂蛀虫卵的解毒过程。

关 键 词:荔枝蒂蛀虫  化学结合蛋白  基因克隆  序列分析  分子对接  除虫脲
收稿时间:2020/12/31 0:00:00

Molecular cloning of five chemosensory proteins from Conopomorpha sinensis eggs and gene expression after diflubenzuron treatment
YAO Qiong,QUAN Linf,NIE Jing,XU Shu,LI Wenjing,DONG Yizhi,CHEN Bingxu.Molecular cloning of five chemosensory proteins from Conopomorpha sinensis eggs and gene expression after diflubenzuron treatment[J].Journal of South China Agricultural University,2021,42(5):60-68.
Authors:YAO Qiong  QUAN Linf  NIE Jing  XU Shu  LI Wenjing  DONG Yizhi  CHEN Bingxu
Institution:Plant Protection Research Institute, Guangdong Academy of Agricultural Sciences/Guangdong Provincial Key Laboratory of New High Technology for Plant Protection, Guangzhou 510640, China
Abstract:
Keywords:Conopomorpha sinensis  chemosensory protein  gene cloning  sequence analysis  molecular docking  diflubenzuron
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