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副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌和胸膜肺炎放线杆菌多重PCR检测方法的建立及应用
引用本文:陈申秒,李郁,王金生,李炳更,魏建忠.副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌和胸膜肺炎放线杆菌多重PCR检测方法的建立及应用[J].畜牧与兽医,2010,42(11).
作者姓名:陈申秒  李郁  王金生  李炳更  魏建忠
作者单位:1. 山东滨州沃华生物工程有限公司,山东,滨州,256606
2. 安徽农业大学动物科技学院,安徽,合肥,230036
基金项目:安徽省"十一五"科技攻关项目 
摘    要:在已建立的副猪嗜血杆菌(HPS)、多杀性巴氏杆菌(Pm)、胸膜肺炎放线杆菌(APP)的单重PCR检测方法的基础上,通过对扩增条件的优化,利用一次PCR反应可同时扩增出APP的256 bp、Pm的457 bp、HPS的822 bp的特异性片段,建立了HPS、Pm、APP的多重PCR实验室诊断方法。该复合PCR可检测60 pg的HPS、120 pg的Pm、50 pg的APP。利用该方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性猪体内分离到的39株细菌,结果显示HPS、Pm、APP分别为12、16、2株,对39份病料的检测与常规细菌分离鉴定结果一致,可见该方法适用于HPS、APP、Pm的临床快速检测。

关 键 词:副猪嗜血杆菌  多杀性巴氏杆菌  猪胸膜放线杆菌  多重PCR

Establishment and application of multiplex PCR method for Haemophilus parasuis,Pasteurella multocida and Actinobacillus pleuropneumoniae
CHEN Shen-miao,LI Yu,WANG Jin-sheng,LI Bing-geng,WEI Jian-zhong.Establishment and application of multiplex PCR method for Haemophilus parasuis,Pasteurella multocida and Actinobacillus pleuropneumoniae[J].Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2010,42(11).
Authors:CHEN Shen-miao  LI Yu  WANG Jin-sheng  LI Bing-geng  WEI Jian-zhong
Institution:CHEN Shen-miao1,LI Yu2,WANG Jin-sheng1,LI Bing-geng1,WEI Jian-zhong2(1.ShandongBinzhou Wohua Biotech Co.Ltd,Binzhou 256606,China,2.College of Animal Science and Technology,Anhui Agricultural University,Hefei 230036,China)
Abstract:The multiplex PCR method for Haemophilus parasuis(HPS),Pasteurella multocida(Pm) and Actinobacillus pleuropneumoniae(APP) has been developed based on the established single PCR for these pathogens.The multiplex PCR procedure was further optimized.A 256 bp fragment of APP,a 457 bp fragment of Pm and a 822 bp fragment of HPS could be simultaneously amplified in a PCR reaction.The test sensitivity showed that the PCR method could detect 60 pg of HPS,120 pg of Pm and 50 pg of APP,respectively.Thirty-nine strain...
Keywords:Haemophilus parasuis  Pasteurella multocida  Actinobacillus pleuropneumoniae  multiplex PCR  
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