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家蚕Poly(A)结合蛋白基因BmPABP的克隆及序列与功能分析
引用本文:徐汉福,王峰,王根洪,段晓利,马三垣,夏庆友.家蚕Poly(A)结合蛋白基因BmPABP的克隆及序列与功能分析[J].蚕业科学,2011,37(3).
作者姓名:徐汉福  王峰  王根洪  段晓利  马三垣  夏庆友
作者单位:农业部蚕桑功能基因组与生物技术重点开放实验室,西南大学蚕学与系统生物学研究所,重庆,400716;重庆大学农学及生命科学研究院,重庆,400030
基金项目:国家自然科学基金项目(No.31000981); 重庆市自然科学基金项目(No.2010BB1144)
摘    要:Poly(A)结合蛋白Poly(A)-binding protein,PABP]是广泛存在于真核生物细胞内的一类高保守性蛋白,通过与Poly(A)的结合形成翻译起始复合物调节mRNA的稳定性和翻译效率。利用RT-PCR方法克隆了家蚕Poly(A)结合蛋白基因Bm-PABP,该基因含有4个外显子,开放阅读框(open reading frame,ORF)长度为1 812 bp,编码603个氨基酸,具有4个典型的RNA识别模体(RNA recognization motif,RRM)和1个保守的C末端结构域。基因芯片数据分析显示,BmPABP在家蚕5龄第3天幼虫各组织以及5龄第4天至化蛾阶段具有高水平的转录表达。构建基于家蚕Actin4启动子的瞬时转染载体pSLA4-Bm-PABP,将其与携带有荧光素酶报告基因的pSLA4-LUC质粒分别按1∶1和2∶1的摩尔比混合后共转染昆虫Sf9细胞,于转染后72 h检测荧光素酶活性,结果显示荧光素酶的活性较对照分别提高了11.9倍和7.5倍。研究结果初步证实了BmPABP具有促进目的基因表达的功能,同时提示利用BmPABP有望提高外源基因在转基因家蚕中的表达水平,可应用于家蚕生物反应器研究。

关 键 词:家蚕  Poly(A)结合蛋白  基因克隆  序列结构  细胞转染  功能

Cloning,Sequence and Functional Analysis of Poly(A)-binding Protein Gene BmPABP in the Silkworm,Bombyx mori
XU Han-Fu,WANG Feng,WANG Gen-Hong,DUAN Xiao-Li,MA San-Yuan,XIA Qing-You.Cloning,Sequence and Functional Analysis of Poly(A)-binding Protein Gene BmPABP in the Silkworm,Bombyx mori[J].Acta Sericologica Sinica,2011,37(3).
Authors:XU Han-Fu  WANG Feng  WANG Gen-Hong  DUAN Xiao-Li  MA San-Yuan  XIA Qing-You
Institution:XU Han-Fu1 WANG Feng1 WANG Gen-Hong2 DUAN Xiao-Li1 MA San-Yuan1 XIA Qing-You1*(1 The Key Laboratory for Sericulture Functional Genomics and Biotechnology of Agricultural Ministry,Institute of Sericulture and Systems Biology,Southwest University,Chongqing 400716,China,2Institute of Agriculture and Life Science,Chongqing University,Chongqing 400030,China)
Abstract:Poly(A)-binding protein(PABP) is one class of the highly conserved proteins found in many eukaryotes.PAPB was shown to play a role in regulation of mRNA stability and translation efficiency by binding the Poly(A) tail of mRNA and forming a translation initiation complex.Here we reported the cloning of BmPABP gene from the silkworm(Bombyx mori) by RT-PCR method.BmPABP contains four exons and a 1 812 bp open reading frame(ORF) which encodes a putative protein of 603 amino acids.BmPABP possesses four typical R...
Keywords:Bombyx mori  Poly(A)-binding protein  Molecular cloning  Sequence structure  Cell transfection  Functional  
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