| 桔小实蝇丝氨酸蛋白酶基因（BdorSer）的克隆与表达分析 |
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| 引用本文： | 胡黎明,曾 玲,申建梅.桔小实蝇丝氨酸蛋白酶基因（BdorSer）的克隆与表达分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2012,40(7):70-76. |
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| 作者姓名： | 胡黎明 曾 玲 申建梅 |
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| 作者单位： | 仲恺农业工程学院 农学院;华南农业大学 昆虫生态研究室;仲恺农业工程学院 农学院 |
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| 基金项目： | 公益性行业（农业）科研专项（200903047）；国家自然科学基金项目（31171852）；广东省大学生创新实验项目（1134711022） |
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| 摘 要： | 【目的】克隆桔小实蝇丝氨酸蛋白酶基因（Bactrocera dorsalis serine protease,BdorSer），研究BdorSer在不同组织和不同发育时期的表达情况，探索其可能参与的生理过程。【方法】采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和快速扩增cDNA末端(RACE)技术克隆BdorSer，对其编码蛋白氨基酸序列信息和进化关系进行分析；采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）方法，研究BdorSer mRNA在桔小实蝇不同组织及不同发育时期的相对表达量。【结果】克隆获得了BdorSer，该基因ORF全长1 239 bp。氨基酸序列一致性分析表明，BdorSer与拟暗果蝇（Drosophila pseudoobscura）丝氨酸蛋白酶（登录号XP_001352960）氨基酸序列的一致性最高，为65.8%。实时荧光定量PCR分析表明，BdorSer mRNA在桔小实蝇雌雄虫的不同组织中都有表达，且在触角中的表达量最高，分别是雌虫胸部的43.6和26.8倍。BdorSer mRNA在生殖节中表现出较大的性别差异表达特征，雄虫生殖节中的mRNA表达量是雌虫的18.25倍。BdorSer mRNA几乎在昆虫发育的各个时期都有表达，其中在卵及1，2，3龄幼虫中的表达量分别是10 d 蛹的 0.68，1.63，4.31和15.8倍。BdorSer mRNA随蛹的发育其表达量逐渐减低，1，4，7 d蛹中的表达量分别是10 d蛹的325，125和41倍。【结论】克隆获得了BdorSer，其表达的BdorSer蛋白可能在雄虫的生殖生理中发挥了作用，同时也可能参与了桔小实蝇的变态发育过程，尤其是1 d蛹的发育过程。
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| 关 键 词： | 桔小实蝇 丝氨酸蛋白酶 基因克隆 实时荧光定量PCR |
| 收稿时间： | 2012/2/14 0:00:00 |
Cloning and expression analysis of serine protease gene in Bactrocera dorsalis (Hendel) (Diptera:Tephritidae) |
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| HU Li-ming,ZENG Ling,SHEN Jian-mei,BIN Shu-ying,LIAO Hong-zhi,CHEN Gao-feng,LIN Jin-tian.Cloning and expression analysis of serine protease gene in Bactrocera dorsalis (Hendel) (Diptera:Tephritidae)[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2012,40(7):70-76. |
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| Authors: | HU Li-ming ZENG Ling SHEN Jian-mei BIN Shu-ying LIAO Hong-zhi CHEN Gao-feng LIN Jin-tian |
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| Institution: | 1(1 College of Agriculture,Zhongkai University of Agriculture and Engineering,Guangzhou,Guangdong 510225,China; 2 Laboratory of Insect Ecology,South China Agricultural University,Guangzhou,Guangdong 510642,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bactrocera dorsalis serine protease gene cloning real-time PCR |
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