| 水牛转录因子Klf4基因编码区序列克隆及在真核细胞中表达研究 |
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| 引用本文： | 邓彦飞,石德顺,刘庆友,邓海莹,罗婵,杨素芳.水牛转录因子Klf4基因编码区序列克隆及在真核细胞中表达研究[J].广西农业生物科学,2013(6):713-718. |
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| 作者姓名： | 邓彦飞 石德顺 刘庆友 邓海莹 罗婵 杨素芳 |
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| 作者单位： | 亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西大学,南宁530005 |
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| 基金项目： | 本研究由国家“863”重大专项（2011AA100607）、国家自然科学基金资助项目（31360287）、广西回国基金项目（2013GXNSFCB019001）和广西大学科研基金项目（XBZ120572）共同资助 |
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| 摘 要： | Krtippel样因子4依脾）在调控细胞增殖、分化和胚胎发育中有重要作用，也是生产诱导多能干细胞（iPSC）重要的转录因子之一。本研究对水牛K牌进行克隆和表达研究，为生产水牛iPSC和研究其在体细胞重编程中的机理奠定基础。采用RT—PCR克隆并分析水牛K牌编码区序YIJ（CDS）；mRNA水平和蛋白水平检测K牌在水牛胎儿成纤维细胞（BFF）和胃上皮细胞（BSEC）中的表达情况；构建表达水牛K孵的逆转录病毒载体（pMX—Klf4）、病毒感染BFF、免疫荧光技术分析外源K脾在BFF中的表达情况。结果表明：水牛CDS全长1434bp，氨基酸序列与牛、猪、人和鼠相应氨基酸序列的相似性分别为99％、97％、92％$N92％，蛋白结构保守；内源Klf4在BFF和BSEC中都有表达，pMX介导的外源K脾能在BFF中表达。
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| 关 键 词： | 水牛 Klf4 编码区序列 真核表达 |
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