细粒棘球绦虫Eg95-5蛋白生物信息学分析及鉴定 |
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引用本文: | 胡尊楠,马忠臣,何金科,徐明国,陈创夫,王震.细粒棘球绦虫Eg95-5蛋白生物信息学分析及鉴定[J].黑龙江畜牧兽医,2019(5). |
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作者姓名: | 胡尊楠 马忠臣 何金科 徐明国 陈创夫 王震 |
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作者单位: | 石河子大学动物科技学院;石河子大学生命科学学院;西部地区高发人兽共患传染性疾病防治协同创新中心 |
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摘 要: | 为了制备一定纯度和浓度细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus, Eg)Eg95-5蛋白,进一步开发新型疫苗和建立新的疾病诊断方法,试验采用生物信息学分析、pMD19-T-Eg95-5与pET30a-Eg95-5载体的构建、Eg95-5蛋白诱导表达及纯化、免疫印迹技术(Western-blot)对Eg95-5蛋白序列和反应原性进行研究。结果表明:Eg95-5蛋白无信号肽和跨膜结构,蛋白含有6个抗原决定簇和12个磷酸化位点,二级结构以无规则卷曲(39.25%)、延伸链(33.64%)和α-螺旋(21.50%)为主,并获得了Eg95-5的三级结构模型;成功克隆并构建Eg95-5重组表达载体,获得了高纯度的Eg95-5蛋白,该蛋白可与患病动物血清发生特异性反应。说明Eg95-5蛋白结构较为保守,是无信号肽和非跨膜蛋白,作为抗原可以引起良好的免疫反应。
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