| 小金蝠蛾酚氧化酶原基因的克隆及表达分析 |
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| 引用本文： | 龙成燕,仝超群,陈若霓,陈仕江,卿玉玲,秦少容,周泽扬,李春峰.小金蝠蛾酚氧化酶原基因的克隆及表达分析[J].西北农业学报,2019,28(12):2060-2068. |
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| 作者姓名： | 龙成燕 仝超群 陈若霓 陈仕江 卿玉玲 秦少容 周泽扬 李春峰 |
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| 作者单位： | (1.西南大学，家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715；2.重庆太极医药研究院有限公司，重庆 401147；3.重庆市中药研究院，重庆 400065) |
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| 基金项目： | 西南大学中央高校基本科研业务费团队项目（XDJK2018AA001）；太极集团有限公司项目(2015071)。 |
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| 摘 要： | 通过逆转录PCR技术克隆获得小金蝠蛾(Thitarodes xiaojinensis)幼虫酚氧化酶原(TxPPO)基因cDNA的部分序列,对其进行生物信息学分析及组织表达谱分析。克隆该基因cDNA所得的部分序列长度为2654 bp,其CDS全长为2 070 bp,编码的蛋白质由689个氨基酸残基组成,预测分子质量为79.31 ku、等电点为5.91,无信号肽。进一步对TxPPO氨基酸序列分析及系统发育树构建,发现该基因与其他鳞翅目昆虫酚氧化酶原-2(PPO2)聚为一支,同源性较高,相似度为62.45%～63.61%。此外,TxPPO含有与其他鳞翅目昆虫PPO相似的丝氨酸蛋白酶酶切位点、thiolester-like位点、3个保守的血蓝蛋白结构域、2个高度保守的铜离子结合位点及位于铜离子结合位点内的6个保守的组氨酸残基。通过实时荧光定量PCR及Western blot方法对PPO基因在小金蝠蛾幼虫各组织中的表达情况进行检测,RT-qPCR结果显示,该基因在小金蝠蛾幼虫的血细胞中转录水平最高,其次为头部、脂肪体、表皮、中肠组织;Western blot检测结果表明,该蛋白分布于小金蝠蛾幼虫的血浆、头部、表皮组织及中肠组织中,而未在脂肪体检测到其分布。
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| 关 键 词： | 蝙蝠蛾 酚氧化酶原 基因克隆 表达谱 |
Cloning and Tissue Expression Analysis of Prophenoloxidase Gene from Thitarodes xiaojinensis |
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| LONG Chengyan,TONG Chaoqun,CHEN Ruoni,CHEN Shijiang,QING Yuling,QIN Shaorong,ZHOU Zeyang and LI Chunfeng.Cloning and Tissue Expression Analysis of Prophenoloxidase Gene from Thitarodes xiaojinensis[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2019,28(12):2060-2068. |
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| Authors: | LONG Chengyan TONG Chaoqun CHEN Ruoni CHEN Shijiang QING Yuling QIN Shaorong ZHOU Zeyang and LI Chunfeng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Thitarodes xiaojinensis Prophenoloxidase Gene clone Expression profile |
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