| Prx Ⅱ基因敲降L02细胞系的构建及其对细胞增殖的影响 |
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| 引用本文： | 满艺,甄兴,孔令祖,申贵男,韩英浩,金美华.Prx Ⅱ基因敲降L02细胞系的构建及其对细胞增殖的影响[J].黑龙江八一农垦大学学报,2019,31(1). |
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| 作者姓名： | 满艺 甄兴 孔令祖 申贵男 韩英浩 金美华 |
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| 作者单位： | 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆,163319;黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆,163319 |
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| 基金项目： | 黑龙江八一农垦大学校科研启动计划项目 |
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| 摘 要： | 构建PrxⅡ基因敲降L02细胞系并确定PrxⅡ基因对L02细胞增殖的影响。利用慢病毒介导的shRNA干扰技术、流式细胞术、荧光显微照相、蛋白质免疫印迹、MTT asssay等方法建立并检验PrxⅡ敲降L02细胞系及其对L02细胞的增殖影响。结果显示:选用5’-CCGCTTGTCTGAGGATACGTT-3’片段作为干扰PrxⅡ基因片段,利用慢病毒敲降L02细胞。同时处理嘌呤霉素筛选得到shPrxⅡ组细胞和Scramble组细胞,使用流式细胞术、荧光显微照相技术对shPrxⅡ组细胞和Scramble组细胞进行检测,结果均显示出GFP蛋白表达;此后利用蛋白质免疫印迹法检测出shPrxⅡ组细胞中PrxⅡ蛋白表达水平较Blank、Scram-ble组显著降低(P0.05),Blank组与Scramble组细胞中PrxⅡ蛋白表达水平无明显差异。在MTT结果中显示shPrxⅡ组细胞增殖速率明显高于Scramble组,且具有统计学意义。成功构建PrxⅡ敲降的L02细胞系,发现PrxⅡ敲降后显著提高L02细胞的增殖速率。
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| 关 键 词： | L02细胞系 Prx Ⅱ 细胞增殖 RNA干扰技术 慢病毒 |
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