| 稻瘟茵胞外蛋白的提取及电泳方法初探 |
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| 引用本文： | 常明,苏源,蔡永占,孔垂思,仓晓燕,杨静,刘林,朱有勇,李成云.稻瘟茵胞外蛋白的提取及电泳方法初探[J].云南农业大学学报,2009,24(5):661-666. |
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| 作者姓名： | 常明 苏源 蔡永占 孔垂思 仓晓燕 杨静 刘林 朱有勇 李成云 |
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| 作者单位： | 云南农业大学农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室,云南昆明650201 |
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| 摘 要： | 利用蛋白质组学研究方法对稻瘟菌的胞外蛋白进行分析，可以更好地了解该病原菌的生物学特性和致病机制。蛋白质样品制备和双向电泳，都是蛋白质组学研究的基础。采用冷冻干燥，透析结合法与三氯乙酸-脱氧胆酸钠沉淀法（TCA-DOC沉淀法）提取液体培养稻瘟菌得到的胞外蛋白，利用17cm pH3.0-10.0与17cm pH4.0-7.0两种pH梯度IPG胶条对同一样品进行第一向等电聚焦，12％ SDS-PAGE凝胶进行第二向电泳，银染后用PDQuest软件（V7.4）对电泳图谱进行分析。结果表明，在上述两种提取稻瘟菌胞外蛋白的方法中，TCA-DOC沉淀法具有较好的提取效果，应用该实验方法得到的蛋白质分布在pH4.0-7.0之间的点数达到621个，因此在双向电泳中，采用pH4.0-7.0的胶条具有较好的分辨率。
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| 关 键 词： | 稻瘟菌 胞外蛋白 提取 双向电泳 |
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