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红花油体表达人透明质酸酶基因的初步研究
引用本文:杨 晶,李洪锐,易善勇,等.红花油体表达人透明质酸酶基因的初步研究[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2015,43(9):191-195.
作者姓名:杨 晶  李洪锐  易善勇  
作者单位:吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心,吉林农业大学 生物反应器与药物开发教育部工程研究中心
基金项目:“十二五”国家高新技术研究与发展计划项目(2011AA100606);中小企业创新基金项目(13C26212201223);长春市重大科技攻关项目(2014077);吉林省教育厅项目(201458/2015190)
摘    要:【目的】获得转人源透明质酸酶基因PH20(hPH20)红花,为hPH20药用蛋白的生产奠定基础。【方法】人工合成hPH20基因,并在两端引入NcoⅠ/HindⅢ酶切位点。将合成的hPH20基因与pUC57载体连接,构建克隆载体pUC57-hPH20,对其进行双酶切鉴定。用NcoⅠ/HindⅢ酶切pUC57-hPH20获得hPH20基因,将其插入到植物油体高效表达载体pOBT上,构建重组质粒pOBT-hPH20,进行PCR和双酶切鉴定。采用冻融法将重组质粒pOBT-hPH20转入根瘤农杆菌EHA105中,通过农杆菌介导法转化红花,对转hPH20基因红花植株进行PCR检测。【结果】成功构建了hPH20基因的植物油体表达载体pOBT-hPH20,获得了3株PCR检测呈阳性的转hPH20基因红花植株。【结论】建立了完善的红花再生体系,获得了转hPH20基因的红花植株。

关 键 词:红花  透明质酸酶hPH20  油体
收稿时间:2014/2/21 0:00:00

Expression of human hyaluronidase gene in oil body of safflower
YANG Jing,LI Hong-rui and YI Shan-yong,et al.Expression of human hyaluronidase gene in oil body of safflower[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2015,43(9):191-195.
Authors:YANG Jing  LI Hong-rui and YI Shan-yong  
Abstract:
Keywords:safflower  hyaluronidase hPH20  oil body
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