| 蜘蛛拖丝蛋白基因逆转录病毒载体构建与检测 |
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| 引用本文： | 安铁洙,宁方勇,王春生,朴善花,梁洋.蜘蛛拖丝蛋白基因逆转录病毒载体构建与检测[J].中国兽医学报,2013,33(1):64-68. |
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| 作者姓名： | 安铁洙 宁方勇 王春生 朴善花 梁洋 |
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| 作者单位： | 1. 东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨,150040
2. 东北林业大学生命科学学院,黑龙江哈尔滨150040;东北农业大学动物科学技术学院,黑龙江哈尔滨150030 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30771538,31000990,30771538) |
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| 摘 要： | 利用pIRES2-EGF和pMX载体以及前期获得的蜘蛛拖丝蛋白基因(2S)构建逆转录病毒载体pMX-2S-IRES-EGFP.采用磷酸钙法将pMX-2S-IRES-EGFP质粒转染到PlatE细胞并获得重组逆转录病毒.通过小鼠成纤维细胞系NIH3T3检测病毒侵染能力,并采用PCR法检测蜘蛛拖丝蛋白基因在NIH-3T3细胞的整合状况.结果显示,成功构建了逆转录病毒载体pMX-2S-IRES-EGFP；通过感染NIH-3T3细胞测定重组逆转录病毒滴度约为2×105 cfu/mL；PCR鉴定结果显示,目的基因2S-IRES-EGFP已整合入NIH-3T3细胞基因组中.
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| 关 键 词： | 蜘蛛拖丝蛋白基因 逆转录病毒载体 重组逆转录病毒 |
Construction and detection of spider dragline silk protein gene retroviral vector |
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| AN Tie-zhu,NING Fang-yong,WANG Chun-sheng,PIAO Shan-hua,LIANG Yang.Construction and detection of spider dragline silk protein gene retroviral vector[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2013,33(1):64-68. |
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| Authors: | AN Tie-zhu NING Fang-yong WANG Chun-sheng PIAO Shan-hua LIANG Yang |
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| Institution: | 1(1.College of Life Science,Northeast Forestry University,Harbin 150040,China;2.College of Animal Science and Technology,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China) |
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| Abstract: | |
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