| 猪弓形虫实时荧光PCR检测方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 袁淑萍,谢彩华,王东方,班付国,闫若潜.猪弓形虫实时荧光PCR检测方法的建立与应用[J].中国动物检疫,2020,37(5):106-110. |
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| 作者姓名： | 袁淑萍 谢彩华 王东方 班付国 闫若潜 |
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| 基金项目： | 河南省科技创新人才计划项目（174200510003） |
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| 摘 要： | 为建立一种快速、敏感、特异的猪弓形虫检测方法,根据弓形虫保守基因序列,设计一套特异性引物和FAM荧光素标记的MGB探针;通过对PCR反应体系和反应条件进行优化筛选,建立了猪弓形虫实时荧光定量PCR检测方法,并对此PCR检测方法进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法对60份疑似弓形虫感染的临床样品进行了检测。结果显示:建立的猪弓形虫实时荧光定量PCR检测方法在101～107拷贝/μL模板范围内有很好的线性关系;对弓形虫重组阳性质粒出现阳性扩增信号,但对阴性对照的水和其他7种病原对照未扩增出特异性曲线;最低检测模板浓度为10拷贝/μL;自60份疑似猪弓形虫感染样品中检出32份阳性,并且和克隆测序结果一致。结果表明,本研究建立的猪弓形虫实时荧光定量PCR检测方法可用于猪弓形虫的快速检测,从而为猪弓形虫病的诊断提供了特异、敏感、高通量的方法。
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| 关 键 词： | 弓形虫病 实时荧光定量PCR 猪 诊断 |
Development and Application of a Real-time PCR Method for Detection of Toxoplasma gondii |
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| Yuan Shuping,Xie Caihu,Wang Dongfang,BanFuguo,Yan Ruoqian.Development and Application of a Real-time PCR Method for Detection of Toxoplasma gondii[J].China Journal Of Animal Quarantine,2020,37(5):106-110. |
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| Authors: | Yuan Shuping Xie Caihu Wang Dongfang BanFuguo Yan Ruoqian |
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