| 猪流产衣原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 周丹娜,李文浩,阮征,刘威,郭锐,杨克礼,段正赢,袁芳艳,刘泽文,陈文杰,孟丽,焦祖武,田永祥.猪流产衣原体实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用[J].动物医学进展,2018(9). |
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| 作者姓名： | 周丹娜 李文浩 阮征 刘威 郭锐 杨克礼 段正赢 袁芳艳 刘泽文 陈文杰 孟丽 焦祖武 田永祥 |
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| 作者单位： | 农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室;湖北省农业科学研究院畜牧兽医研究所;武汉市动物疫病预防控制中心 |
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| 摘 要： | 为建立一种快速、准确检测猪流产衣原体(Chlamydophila abortus,C.abortus)实时荧光定量PCR检测方法,根据C.abortus主要外膜蛋白(MOMP)的基因序列设计1对引物和1条分子探针(FAM和Dabycl标记),以构建的重组质粒作为标准阳性质粒,通过筛选和条件优化,建立了猪流产衣原体实时荧光定量PCR诊断方法。重复性、特异性及敏感性试验结果显示,重组质粒为标准品建立的标准曲线在1.0×10~2拷贝/μL~1.0×10~7拷贝/μL内具有良好的线性关系,其相关系数为0.993 2,扩增效率为94.7%,灵敏度达到1.0拷贝/μL,批间批内变异系数(CV)为0.022%~0.051%,建立的方法可有效区分流产衣原体、猪支原体、猪衣原体、肺炎衣原体及猪蓝耳病毒等病原,具有良好的临床应用前景。
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