| 副鸡禽杆菌LAMP检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 梅晨,李淑芳,徐玉智,张培君,龚玉梅,王宏俊.副鸡禽杆菌LAMP检测方法的建立[J].动物医学进展,2018(1). |
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| 作者姓名： | 梅晨 李淑芳 徐玉智 张培君 龚玉梅 王宏俊 |
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| 作者单位： | 北京市农林科学院畜牧兽医研究所/畜禽疫病防控技术北京市重点实验室; |
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| 摘 要： | 应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立了快速特异的检测副鸡禽杆菌的方法。利用在线引物设计软件Primer Explorer Version 4.0,针对副鸡禽杆菌16SRNA基因序列设计两组LAMP引物,并对副鸡禽杆菌特异性DNA的扩增条件进行优化,评价所建立LAMP的特异性和灵敏性。结果显示,优化后的反应条件为65℃恒温反应60min,内引物1.60pmol/μL、外引物0.20pmol/μL。该LAMP对13株副鸡禽杆菌均发生了扩增反应,而对大肠埃希菌、禽多杀性巴氏杆菌、空肠弯曲杆菌等14株其他病原微生物没有扩增反应;该LAMP最低检出量为0.17pg/反应,敏感性远高于常规PCR的56pg/反应。结果表明,所建立的副鸡禽杆菌LAMP具有快速、高效、方便操作等特点,适用于基层兽医部门进行副鸡禽杆菌的快速检测。
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