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盐酸可乐定人工抗原及其鼠源多抗的制备
引用本文:王 耀,曹金博,,曹夕丹,李铁梅,邢云瑞,孟继秋,庞杏豪,孙亚宁,陈秀金,李兆周,胡骁飞.盐酸可乐定人工抗原及其鼠源多抗的制备[J].西北农业学报,2021(11):1595-1602.
作者姓名:王 耀  曹金博    曹夕丹  李铁梅  邢云瑞  孟继秋  庞杏豪  孙亚宁  陈秀金  李兆周  胡骁飞
作者单位:(1.河南科技大学 食品与生物工程学院,河南洛阳 471003;2.河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室,郑州 450002;3.西北农林科技大学 动物医学院,陕西杨凌 712100;4.中国检验检疫科学研究院,北京 100176)
基金项目:国家自然科学基金(31702218);国家级大学生创新创业训练计划(202010464024);河南省青年人才托举工程(2020HYTP029);河南省动物免疫学重点实验室开放课题(PKLAI20170603);河南省科技攻关(182102110445);河南省自然科学基金(182300410038);河南省农业科学院科研发展专项资金(2019CY04) 。
摘    要:以盐酸可乐定(Clonidine hydrochloride,CLO)的衍生物盐酸阿可乐定(Apraclonidine hydrochloride,ACLO)为半抗原,采用重氮化法合成人工抗原,免疫小鼠制备高敏感性、特异性的CLO鼠源多抗并进行鉴定,为CLO单克隆抗体的制备奠定基础。将ACLO分别与牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)和鸡卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)偶联,合成免疫原CLO-BSA和包被原CLO-OVA,经紫外扫描和SDS-PAGE凝胶电泳鉴定偶联效果后,免疫BALB/c小鼠,并对获得的鼠源多抗采用间接ELISA和间接竞争ELISA鉴定其特性。结果显示,免疫的4只小鼠血清抗体效价均达到1∶25 600以上,其中2号小鼠的抗体敏感性最高,半数抑制质量浓度(IC50)为7.026 ng/mL,与其他几种常见瘦肉精类药物的交叉反应率均小于0.1%,特异性良好。表明成功合成免疫原性良好的CLO人工抗原,并获得敏感性高、特异性强的CLO鼠源多抗,为其单克隆抗体的制备及免疫学快速检测方法的建立奠定良好基础。

关 键 词:盐酸可乐定  人工抗原  多抗  ELISA

Preparation of Clonidine Hydrochloride Artificial Antigen and Its Mouse Polyclonal Antibody
WANG Yao,CAO Jinbo,CAO Xidan,LI Tiemei,XING Yunrui,MENG Jiqiu,PANG Xinghao,SUN Yaning,CHEN Xiujin,LI Zhaozhou and HU Xiaofei.Preparation of Clonidine Hydrochloride Artificial Antigen and Its Mouse Polyclonal Antibody[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2021(11):1595-1602.
Authors:WANG Yao  CAO Jinbo  CAO Xidan  LI Tiemei  XING Yunrui  MENG Jiqiu  PANG Xinghao  SUN Yaning  CHEN Xiujin  LI Zhaozhou and HU Xiaofei
Abstract:
Keywords:Clonidine hydrochloride  Artificial antigen  Polyclonal antibody  ELISA
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