| 镰形扇头蜱丝氨酸蛋白酶SP30基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 关洁,曹杰,张厚双,周勇志,周金林.镰形扇头蜱丝氨酸蛋白酶SP30基因的克隆及原核表达[J].中国动物传染病学报,2012,20(6):45-50. |
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| 作者姓名： | 关洁 曹杰 张厚双 周勇志 周金林 |
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| 作者单位： | 1. 上海师范大学生命与环境科学学院,上海200234 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室,上海200241
2. 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室,上海,200241 |
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| 基金项目： | 中央级公益性科研院所基本业务费 |
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| 摘 要： | 根据丝氨酸蛋白酶保守性氨基酸序列设计引物,以镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA为模板,经PCR扩增得到SP30基因的保守区,通过5’RACE(rapid amplification of cDNA Ends)和3’RACE技术得到全长基因。将该基因连入原核表达载体pGEX-4T-1,经IPTG诱导纯化得到重组蛋白。以镰形扇头蜱卵、幼蜱、若蜱、成蜱各发育阶段的cDNA为模板进行Real-timePCR实验。结果显示,SP30基因全长1194 bp,开放阅读框长900 bp,编码299个氨基酸,预计蛋白分子质量30 kDa。Real-time PCR分析结果表明,该基因在四个不同的发育阶段均有不同程度的表达。
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| 关 键 词： | 镰形扇头蜱 丝氨酸蛋白酶SP30基因 原核表达 |
CLONING AND PROKARYOTIC EXPRESSION OF SERINE PROTEASE SP30 GENE OF RHIPICEPHALUS HAEMAPHYSALOIDES |
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| GUAN Jie,CAO Jie,ZHANG Hou-shuang,ZHOU Yong-zhi,ZHOU Jin-lin.CLONING AND PROKARYOTIC EXPRESSION OF SERINE PROTEASE SP30 GENE OF RHIPICEPHALUS HAEMAPHYSALOIDES[J].Chinese Journal of Animal Infectious Diseases,2012,20(6):45-50. |
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| Authors: | GUAN Jie CAO Jie ZHANG Hou-shuang ZHOU Yong-zhi ZHOU Jin-lin |
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| Institution: | 1.College of Life and Environment Science,Shanghai Normal University,Shanghai 200234,China;2.Shanghai Veterinary Research Institute,CAAS,Shanghai 200241,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rhipicephalus haemaphysaloides serine protease SP30 gene prokaryotic expression |
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