| 利用E.coli表达系统制备猪细小病毒NS1抗原表位区蛋白的研究 |
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| 引用本文： | 王幸,张建楼,霍珊珊,仲飞,张辉.利用E.coli表达系统制备猪细小病毒NS1抗原表位区蛋白的研究[J].河北农业大学学报,2019,42(1):90-95. |
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| 作者姓名： | 王幸 张建楼 霍珊珊 仲飞 张辉 |
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| 作者单位： | 吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春130118;河北农业大学动物医学院/河北兽医生物技术工程技术研究中心,河北保定071001;河北农业大学动物医学院/河北兽医生物技术工程技术研究中心,河北保定,071001;吉林农业大学动物科学技术学院,吉林长春,130118 |
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| 基金项目： | 河北省高等学校科学技术研究项目 |
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| 摘 要： | 为通过E.coli表达系统制备猪细小病毒NS1抗原表位区蛋白,本试验利用DNAstar软件确定含有抗原表位的NS1蛋白片段,然后运用PCR方法从含有NS1基因的载体中扩增NS1抗原表位区基因片段,并将该基因片段插入到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建成与GST标签融合的NS1抗原表位基因的表达载体pGEX-GST-NS1,将表达载体转化BL21大肠杆菌筛选出工程菌。经IPTG诱导表达NS1融合蛋白,经GST-琼脂糖凝胶磁珠分离纯化,制备出与GST融合的NS1抗原表位蛋白。经SDS-PAGE以及Western blot鉴定,制备的NS1融合蛋白分子量和预期一致,并且可以和抗GST标签抗体进行特异反应,表明NS1抗原蛋白已成功制备,为下一步NS1抗体的研制提供了必要的条件。
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| 关 键 词： | 猪细小病毒 NS1蛋白 抗原表位 分离纯化 |
Preparation of porcine parvovirus NS1 protein fragment containing epitopes using E.coli expression system |
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