罗耳阿太菌源生淀粉糖化酶发酵条件的优化及鉴定 |
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引用本文: | 景 洁,李鸿梅,董金满,等.罗耳阿太菌源生淀粉糖化酶发酵条件的优化及鉴定[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2017,45(11):122-131. |
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作者姓名: | 景 洁 李鸿梅 董金满 等 |
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作者单位: | 吉林农业大学 食品科学与工程学院,吉林农业大学 食品科学与工程学院,吉林农业大学 食品科学与工程学院 |
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基金项目: | 吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目(2015185) |
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摘 要: | 【目的】优化罗耳阿太菌源生淀粉糖化酶的发酵条件,并对其结构进行鉴定。【方法】以玉米淀粉和玉米黄浆作为发酵培养基的主要组分,对罗耳阿太菌进行发酵培养。固定接种量为5%(体积比),以罗耳阿太菌生淀粉糖化酶粗酶产量(U/mL)为评价指标,在单因素试验基础上,选择培养温度(℃)、培养时间(h)、摇床转速(r/min)为优化条件,采用响应面法对罗耳阿太菌源生淀粉糖化酶的发酵条件进行优化。利用扫描电子显微镜观察所得酶对玉米、小麦、木薯、红薯、豌豆生淀粉颗粒的水解效果,并用纳米级高效液相色谱与多级串联离子阱联用分析法(NanoLCESI-MS/MS),对所获得的蛋白(酶)进行结构鉴定。【结果】罗耳阿太菌源生淀粉糖化酶的最佳发酵条件为:培养温度38℃,培养时间81h,摇床转速215r/min,粗酶产量26.238 6U/mL。玉米、小麦、木薯、红薯、豌豆生淀粉经所得酶水解后结构被破坏。NanoLC-ESI-MS/MS分析结果与非冗余蛋白质数据库比对可知,所得酶为糖化酶,分子质量为61 966.69u。【结论】采用最优发酵条件获得的罗耳阿太菌生淀粉糖化酶可以水解玉米、小麦、木薯、红薯、豌豆生淀粉。
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关 键 词: | 罗耳阿太菌 生淀粉糖化酶 发酵条件优化 结构鉴定 |
收稿时间: | 2016/9/23 0:00:00 |
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