| 重组猪肺表面活性蛋白A在昆虫杆状病毒表达系统的表达及体外抗PRRSV活性初步鉴定 |
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| 引用本文： | 李兰,郑其升,张元鹏,李鹏成,肖希龙,付言峰,侯继波.重组猪肺表面活性蛋白A在昆虫杆状病毒表达系统的表达及体外抗PRRSV活性初步鉴定[J].中国农业大学学报,2017,22(4):101-108. |
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| 作者姓名： | 李兰 郑其升 张元鹏 李鹏成 肖希龙 付言峰 侯继波 |
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| 作者单位： | 江苏省农业科学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心, 南京 210014;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009;江苏省农业科学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心, 南京 210014;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009;江苏省农业科学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心, 南京 210014;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009;江苏省农业科学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心, 南京 210014;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009;中国农业大学 动物医学院, 北京 100193;江苏省农业科学院 畜牧研究所, 南京 210014;江苏省农业科学院 国家兽用生物制品工程技术研究中心, 南京 210014;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心, 江苏 扬州 225009 |
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| 基金项目： | 农业部公益性行业（农业）科研专项经费项目（201303046） |
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| 摘 要： | 为研究重组猪肺表面活性蛋白A(RpSP-A)的抗病毒活性,采用Bac-to-Bac系统对RpSP-A蛋白进行表达。首先PCR扩增目的基因并将其克隆至pFastBac1转移载体获得pFast-SP-A,通过转化DH10Bac感受态细胞获得重组Bacmid,然后转染sf9细胞获得重组杆状病毒rBV-SP-A,在sf9细胞上进行目的蛋白的表达,经镍柱纯化、脱盐柱处理后,采用蚀斑减少方法评价RpSP-A对PRRSV感染Marc-145细胞的抑制作用。结果显示RpSP-A在sf9细胞中得到正确表达,并且能够降低PRRSV在Marc-145细胞上的感染,补加Ca~(2+)时30μg/mL RpSP-A抑制率高达77%,15μg/mL RpSP-A抑制率为43%,未补加Ca~(2+)时RpSP-A没有表现出抑制作用。上述结果表明利用Bac-to-Bac系统可以稳定获得大量具有抗PRRSV作用的可溶性RpSP-A。
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| 关 键 词： | 猪 表面活性蛋白A 杆状病毒表达 猪繁殖与呼吸综合征病毒 抗病毒活性 |
| 收稿时间： | 2016/4/7 0:00:00 |
Expression of recombint pig lung surfactant protein A and its antiviral activity against PRRSV in vitro |
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| LI Lan,ZHENG Qisheng,ZHANG Yuanpeng,LI Pengcheng,XIAO Xilong,FU Yanfeng and HOU Jibo.Expression of recombint pig lung surfactant protein A and its antiviral activity against PRRSV in vitro[J].Journal of China Agricultural University,2017,22(4):101-108. |
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| Authors: | LI Lan ZHENG Qisheng ZHANG Yuanpeng LI Pengcheng XIAO Xilong FU Yanfeng and HOU Jibo |
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| Institution: | Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, National Research Center of Engineering and Technology for Veterinary Biologicals, Nanjing 210014, China;Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, National Research Center of Engineering and Technology for Veterinary Biologicals, Nanjing 210014, China;Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, National Research Center of Engineering and Technology for Veterinary Biologicals, Nanjing 210014, China;Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou 225009, China;Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, National Research Center of Engineering and Technology for Veterinary Biologicals, Nanjing 210014, China;Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou 225009, China;College of Veterinary Medicine, China Agricultural University, Beijing 100193, China;Institute of Animal Science, Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, Nanjing 210014, China;Jiangsu Academy of Agricultural Sciences, National Research Center of Engineering and Technology for Veterinary Biologicals, Nanjing 210014, China;Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou 225009, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pig surfactant protein A baculovirus expression porcine reproductive and respiratory syndrome virus antiviral activity |
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